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人类疱疹病毒8型K8.1基因真核表达载体的构建与表达
  • ISSN号:0253-4304
  • 期刊名称:广西医学
  • 时间:2012
  • 页码:969-971
  • 分类:R373[医药卫生—病原生物学;医药卫生—基础医学] Q754[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]右江民族医学院微生物学与免疫学教研室,百色市533000
  • 相关基金:广西自然科学基金(桂科自0728246);广西教育厅科研项目(桂教科研[2006326号200610LXl23);右江民族医学院科研项目(右医科字[2007]2号);广西百色市科学研究与技术开发计划项目(百科计字[2006]13号)通信作者:曾怡,E-mail:zengyirr@163.com
  • 相关项目:芒果甙作用于KSHV复制周期的分子机制及对类KS裸鼠移植瘤的影响
中文摘要:

目的构建和表达人类疱疹病毒8型(HHV-8)K8.1基因真核表达载体。方法聚合酶链反应(PCR)法从HHV名感染细胞BCBL-1细胞总DNA中扩增HHV名K8.1全长基因;克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+);将重组K8.1+pcDNA3.1真核表达载体转染人胚肾细胞293细胞,提取总RNA,反转录PCR(RT-PCR)检测重组K8.1+pcDNA3.1真核表达载体在293细胞中的mRNA。结果经测序,克隆的K8.1基因序列与GenBank中登记的K8.1基因100%同源;RT-PCR法检测在约370bp位置出现条带,与预期的369bp大小一致。结论HHV-8K8.1基因真核表达载体构建成功,并可在293细胞中表达。

英文摘要:

Objective To construct the recombinant of eukaryotic expression vector containing K8.1 gene from human herpesvirus 8 (HHV-8) and explore its expression in eukaryotie cell. Methods The full-length gene (HHV-8 K8.1 ) was amplified from HHV-8 infected BCBL-1 cells with polymerase chain reaction(PCR). K8.1 DNA fragments were cloned into eukaryotic vector[ peDNA3.1 ( + ) vector]. 293 cell was transfected with recombinant of K8.1 and pcDNA3.1 ( + ) vector, and total RNA was extracted, mRNA of the recombinant of K8.1 and pcDNA3.1 ( + ) vector in 293 cell was determined by reverse transcription-PCR (RT-PCR). Results The sequence of cloned K8.1 gene was 100% homology with K8.1 gene registered in GenBank. A band about 370 bp as expecting(369 bp) was visible when total RNA of 293 cells was detected with RT-PCR. Conclusion The eukaryotic expression vector of HHV-8 K8.1 has been constructed, and can be expressed in 293 cell.

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期刊信息
  • 《广西医学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:广西壮族自治区卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:广西壮族自治区医学科学信息研究所
  • 主编:王红宇
  • 地址:广西南宁市东葛路20-7号
  • 邮编:530022
  • 邮箱:gxyx@gxmi.net
  • 电话:0771-5871020
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-4304
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1122/R
  • 邮发代号:48-29
  • 获奖情况:
  • 2006年被评为第五届广西优秀自然科学期刊2007年...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:41545