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MSCs心肌样细胞分化过程中GCN5募集促分化相关蛋白的筛选
  • ISSN号:1674-7666
  • 期刊名称:中国细胞生物学学报
  • 时间:0
  • 页码:61-68
  • 分类:Q813.1[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所,重庆400014, [2]重庆医科大学附属儿童医院心血管内科,重庆400014
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30973219)
  • 相关项目:Islet-1因子促干细胞特化心肌细胞的枢纽作用
中文摘要:

筛选并分析间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)诱导分化为心肌样细胞过程中GCN5招募促分化相关蛋白集合体的组成。免疫荧光细胞化学、实时荧光定量PCR鉴定MSCs经5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-azaC)诱导分化为心肌样细胞;免疫共沉淀技术分离、串联质谱鉴定GCN5募集蛋白集合体组成,并从心肌细胞分化角度筛选、验证分化相关蛋白因子。MSCs经5-azaC诱导分化的心肌样细胞表达心肌特异性基因GATA4、MEF2C和心肌细胞结构、功能蛋白cTnt、MHC和Cx43;筛选、验证出心肌细胞分化相关GcN5招募蛋白归类为:(1)DNA结合蛋白Sp1/KLF;(2)转录辅激活子PGC—1α和Rb1;(3)转录延伸复合体组成成分以及信号通路蛋白Akt。通过筛选获得MSCs经诱导向心肌样细胞分化过程中心肌分化相关蛋白因子,为进一步研究干细胞分化信号传导途径、特异性生物靶点干预以及提高干细胞分化效率打下了基础。

英文摘要:

Screening and analysing the recruitment of protein complexes with GCN5 during the process of mesenchymal stem cells (MSCs) differentiating into cardiac myocytes have been designed to identify unknown proteins that were recruited by histone acetyltransferase GCN5. Immunofluorescence cytochemistry and real-time PCR analysis identify that MSCs can differentiate into cardiomyocyte-like cells after 5-azaC induction treatment. We then developed co-immunoprecipitation strategy to separate recruitment proteins with GCN5, and tandem mass spectrometry to identify recruitment proteins. Furthermore, we analyzed functions of GCN5 recruitment proteins from the degree of differentiation of cardiac. MSCs can express higher cardiac-specific genes GATA4 and MEF2C after 5-azaC induction treatment. GCN5 physically interacts with the following proteins which can be categorized as: (1) DNA-binding protein of Spl/KLF; (2) transcriptional co-activators of PGC-1α and Rbl; (3) components of transcription elongation complex, and finally signaling pathway component of protein Akt. This experiment screens GCN5 recruitment proteins for regulation. We will further study differentiating signal transduction pathway of stem cells, as well as the specific biological target for intervention to improve the ratio of differentiation of stem cells on the basis of exoeriments.

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期刊信息
  • 《中国细胞生物学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:中国细胞生物学学会 中国科学院上海生命科学研究院 生物化学与细胞生物学研究所
  • 主编:郭礼和
  • 地址:上海岳阳路319号31A楼303室
  • 邮编:200031
  • 邮箱:CJCB@SIBS.AC.CN
  • 电话:021-54920950 54922892
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-7666
  • 国内统一刊号:ISSN:31-2035/Q
  • 邮发代号:4-296
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:2456