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鲢IL-8基因的克隆与表达分析
  • ISSN号:1000-6907
  • 期刊名称:《淡水渔业》
  • 时间:0
  • 分类:Q959.468[生物学—动物学] S965.113[农业科学—水产养殖;农业科学—水产科学]
  • 作者机构:[1]暨南大学水生生物研究所,广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金委与广东省联合基金重点项目资助(U0631010)
中文摘要:

采用RACE—PCR方法,从鲢(Hypophthalmichthys molitrix)头肾SMART cDNA中获得了679 bp IL-8 cDNA序列。结果显示:该序列包含169bp的5’非编码区,213bp3’端非编码区和297bp的开放阅读框;鲢IL-8的开放阅读框编码98个氨基酸残基,其中包含构成两对二硫键的4个保守半胱氨酸。RT-PCR结果显示鲢:IL-8mRNA主要在胰、肝脏和头肾中表达。将鲢IL-8不含信号肽的成熟多肽克隆到原核融合表达载体pQE30上,转入大肠杆菌M15内进行表达,经SDS-PAGE电泳后显示,重组融合蛋白在分子量约11kD处有一明显表达带,与预期计算的分子量大小相一致。

英文摘要:

Interleukin-8 (IL-8) is a CXC chemokine, which can attract and activate specific types of leukocytes, such as lymphocytes and neut- rophils. The eDNA of silver carp IL-8 consists of 679 bp w/th 169 bp 5' untranslated region (UTR), 213 bp 3'UTR. An open reading frame of 297 bp encoded a 98-amino acid peptide, with four cysteines. Phylo- genetic analyses clearly demonstrated that silver carp IL-8 resembles the IL-8s of other fish. RT-PCR results revealed that stronger products in the pancreas, liver and head kidney were detected. Then the mature peptide of silver carp IL-8 was directionally connected the expression vector pQE30 to construct pQE30-IL8 recombinant. This recombinant was trans- formed into E. coli M15. An expected protein about llkD was found in M15 cell protein after inducting with IPTG by SDS- PAGE analysis.

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期刊信息
  • 《淡水渔业》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国水产学会 中国水产科学研究院长江水产研究所 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
  • 主编:陈大庆
  • 地址:湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路8号
  • 邮编:430223
  • 邮箱:dsyy@chinajournal.net.cn
  • 电话:027-81780185
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-6907
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1138/S
  • 邮发代号:38-32
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:11619