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溶胶凝胶固定化酶流动注射化学发光法测定人体血清中的胆固醇
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:O657.3[理学—分析化学;理学—化学] Q548.1[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]南昌大学化学系,南昌330031, [2]江西省肿瘤医院,南昌330029
  • 相关基金:本文系国家自然科学基金(No.20865003)资助项目
中文摘要:

采用溶胶凝胶技术分别固定了胆固醇脂酶和胆固醇氧化酶,制成固定化酶柱;人体血清中胆固醇脂在胆固醇脂酶的催化作用下生成胆固醇,胆固醇在胆固醇氧化酶的催化作用下被氧化产生H2O2,将其与鲁米诺发生耦合的化学发光反应,在模拟酶血红蛋白的催化作用下产生较强的化学发光。结合流动注射技术,建立了溶胶凝胶固定化酶流动注射化学发光法测定胆固醇的新方法。实验发现,发光强度与胆固醇的浓度在一定范围内呈良好的线性关系,总胆固醇的线性范围为1.01×10^-6~2.02×10^-4mol/L(r=0.9975);检出限为7.5×10^-7mol/L;游离胆固醇的线性范围为5.0×10^-8~2.18×10^-5mol/L(r=0.9991);检出限为5.0×10^-9mol/L。用生化分析仪(东芝TBA-120FR)与本方法进行对照,两种方法无显著性差异。本方法已应用于临床血清样品中胆固醇的检测。

英文摘要:

The cholesterol esterase and its oxidase were respectively immobilized onto sol-gel(tetraethyl orthosilicate)and then an enzymatic reaction column was prepared.Hydrolysis of cholesterol ester took place in the presence of cholesterol esterase to form cholesterol under catalysis of cholesterol oxidase,and Cholesterol was oxidized to produce hydrogen peroxide which reacted with luminal in the presence of simulated enzyme hemoglobin to result in the emission of light.Thereupon,a chemiluminescence system combined with flow injection technology by sol-gel immobilized enzyme was developed for the determination of cholesterol including free and total amount in human serum.The CL intensity was well linear with the concentration of cholesterol;liner range of total and free cholesterol was 1.01×10^-6~2.02×10^-4 mol/L with a detection limit of 7.5×10^-7 mol/L and 5.0×10^-8~2.18×10^-5 mol/L with a detection limit of 5.0×10^-9 mol/L respectively.Contrasted the method with the biochemical analyzer(TBA-120FR),both the methods had no significant difference.This method has been successfully applied for the detection of cholesterol in clinic serum samples.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455