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羊种布鲁氏菌侵染HPT-8细胞cDNA文库的构建及EST序列分析
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:微生物学通报
  • 时间:0
  • 页码:1010-1016
  • 语言:中文
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]石河子大学动物科技学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆石河子832003, [2]石河子大学医学院,新疆石河子832003, [3]南方医科大学,广东广州510515
  • 相关基金:国家973计划项目(No2010CB530200);国际科技合作项目(No.2006DFA33740);国家自然科学基金项目(No.30760187)
  • 相关项目:布鲁氏菌疫苗株流产相关因子Omp25和VirB4蛋白与宿主胚胎滋养细胞相互作用的研究
中文摘要:

拟建立羊种布鲁氏菌侵染HPT-8细胞的cDNA文库。分别提取布鲁氏菌侵染20min、1h、2h、3h、4h后HPT-8细胞总RNA,逆转录合成cDNA,同源重组法构建布鲁氏菌侵染HPT-8细胞的cDNA文库,测定其库容量和重组率,对文库63个克隆进行测序分析,采用BLASTx和BLASTn进行序列同源性比对,并将63个基因进行了功能分类。结果得到的羊种布鲁氏菌侵染人胚胎滋养层细胞HPT-8cDNA文库的库容为1.43×10^6,重组率是96.92%,插入片段大小为0.2—5.0kb。在63个基因中,与转录、能量代谢、运输及细胞因子相关的基因所占比例较高。构建的羊种布鲁氏菌侵染HPT-8细胞的cDNA丈库,为研究宿主细胞受体和布鲁氏菌入侵途径,进一步了解布鲁氏菌的致病机理奠定了基础。

英文摘要:

The cDNA library of HPT-8 ceils infected with Brucella melitensis 027 strain was constructed in this study. Total RNA were extracted from HPT-8 cells at 20 rain, 1 h, 2 h, 3 h and 4 h post infection respectively. With eDNA synthesized by reverse transcriptase, homologous recombination construct infected HPT-8 cell eDNA library. The partial genes were sequenced and classifid by function. The capacity of eDNA library was 1.43 - 106, the recombinant rate was 96.92 percent. The size of the inserted fragments is between 0.2-5.0 kb. 63 clones of eDNA library were random selected and sequenced. The rates of transcription, energy metabolism, transporter, cytokine are relatively high. The results showed that cDNA library was successfully constructed. The cDNA library of HPT-8 cells infected with Brucella melitensis 027 strain may facilitate to identify the receptors associated with the resistance against Brucella in host cells and to cast new light on the mechanism of cellular tropism.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:29487