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虹鳟LECT2的酵母表达、纯化及生物活性分析
  • ISSN号:2095-8137
  • 期刊名称:《动物学研究》
  • 时间:0
  • 分类:Q503[生物学—生物化学] Q959.4[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,浙江宁波315211
  • 相关基金:教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-08-0928):高等学校博士学科点专项科研基金(20093305110001)
中文摘要:

白细胞衍生趋化因子2(1eukocytecell.derivedchemotaxin2,LECT2)是一个参与多种生理和病理过程的分泌型细胞因子。该文采用毕赤酵母表达体系分泌表达虹鳟LECT2,用阳离子交换柱结合分子筛层析方法分离纯化目的蛋白,并获得纯度为96%,得率为120me/t,的重组虹鳟(Oncorhynchusmykiss)LECT2酵母培养物。生物学活性验证表明该重组蛋白能趋化虹鳟头肾来源的巨噬细胞,增强其呼吸爆发和杀菌能力,并改变其细胞因子等基因的表达。综上,该实验建立了一种快速有效的虹鳟LECT2活性重组蛋白的制备方法,为后续相关蛋白的功能研究奠定了基础。

英文摘要:

Leukocyte cell-derived chemotaxin 2 (LECT2) is a secretory cytokine that functions in many physiological and pathological processes. We useda Pichia pastoris expression system for the recombinant expression of rainbow trout LECT2. The recombinant LECT2 was purified by UNOsphere S Cation exchange and size-exclusion chromatography columns. The obtained target protein was highly pure (〉96% homogeneity) and the yield was 〉120 mg/L of yeast cultures. An in vitro chamber assay revealed that recombinant LECT2 could induce chemotactic responses in rainbow trout head kidney-derived macrophages. Recombinant LECT2 not only enhanced macrophage respiratory burst activity and bactericidal activity, but also changed macrophage gene expression. In summary, we established a rapid and efficient method to prepare active recombinant rainbow trout LECT2 using a yeast expression system and column chromatography. Bioactive recombinant LECT2 is essential for studies on protein functions.

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期刊信息
  • 《动物学研究》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院昆明动物研究所
  • 主编:
  • 地址:昆明市教场东路32号中国科学院昆明动物研究所
  • 邮编:650223
  • 邮箱:zoores@mail.kiz.ac.cn
  • 电话:0871-5199026 5113532
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-8137
  • 国内统一刊号:ISSN:53-1229/Q
  • 邮发代号:64-20
  • 获奖情况:
  • 2009年第三届云南省优秀期刊奖,1996年荣获云南省优秀科技期刊二等奖,2000荣获中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),瑞典开放获取期刊指南,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10857