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大肠杆菌单拷贝rRNA操纵元菌株的构建及其生长特性研究
  • ISSN号:1000-2030
  • 期刊名称:《南京农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,江苏南京210095
  • 相关基金:教育部新世纪优秀人才资助计划;国家自然科学基金资助项目(40371069)
中文摘要:

以1株染色体上的5个rRNA操纵元(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH)被敲除的大肠杆菌(Escherichia coli)菌株SQ88为出发菌,运用入Red同源重组系统和卡那霉素抗性基因筛选重组子,并利用抗性基因两端的FRT位点通过位点专一性重组将抗性基因去除,最终成功构建了1株仅具有单拷贝rRNA操纵元(rrnB)的E.coli菌株——SQ88C。试验结果发现,此菌株并未出现明显的生长障碍,其生长速率和rRNA/蛋白值与出发菌株SQS8相比有所下降,但并不显著。从而证明了单拷贝rRNA操纵元在一定条件下能够满足大肠杆菌正常生长的需要,也为在大肠杆菌及其他菌株中快速精确地构建多rRNA基因缺失菌株提供了有益的参考,并可望在16SrRNA基因突变研究等方面发挥一定的作用。

英文摘要:

The Escherichia coli strain SQ88 was selected as the target strain, to which five of rRNA operons (rrnA, rrnD, rrnE, rrnG and rrnH) were sequentially inactivated using λ Red recombination system. Using Red recombination system, SQ88C, a strain just carrying one copy of rRNA operon (rrnB) was constructed by screening Kan resistance mutant. The Kan resistant gene between two FRT recognizing sites was then eliminated designedly. The manipulated strain SQ88C showed no obvious defects in growth rates, and the rRNA/protein ratio remained as the target one. The results suggested that the one copy of rRNA operon could support the growth of E. coli in normal conditions. It indicated that Red in vivo recombination was a convenient method to construct rRNA genes deletion strain. This strain is of potential in the research of 16S rRNA gene mutations.

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期刊信息
  • 《南京农业大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:郑小波
  • 地址:江苏省南京市卫岗1号
  • 邮编:210095
  • 邮箱:nauxb@njau.edu.cn
  • 电话:025-84395214
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2030
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1148/S
  • 邮发代号:28-53
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,全国优秀科技期刊,第二届江苏省十佳科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:22558