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广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化及性质研究
  • ISSN号:1005-930X
  • 期刊名称:《广西医科大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R996.3[医药卫生—毒理学;医药卫生—药学]
  • 作者机构:[1]广西医科大学生物化学与分子生物学教研室,南宁530021, [2]广西医科大学蛇毒研究所,南宁530021, [3]中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101, [4]中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031
  • 相关基金:本课题获国家自然基金资金资助(No.39970174)
中文摘要:

目的:广西眼镜王蛇毒一种碱性蛋白的分离纯化和性质研究。方法:分离纯化采用DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析,Sephadex G-75凝胶过滤和CM-Sepharose CL-6B离子交换柱层析;通过电泳,磷脂酶A2(PLA2)酶活力测定,氨基酸组成分析,N端序列测定及药理实验进行性质研究。结果:从广西眼镜王蛇毒中分离到一种电泳纯的碱性蛋白(命名为CM-IV),相对分子质量约为14000,等电点约为8.65;PLA2的比活力为23μmol·mg^-/min。氨基酸组成分析表明,其分子中Cys的含量占6.85%;利用蛋白质直接测序N端序列为TKCYVTPDVK。药理实验表明它对实验用小白鼠有致死性(LD50约为0.2mg/kg),并具有心脏毒性,但无血小板抑制活性。根据Genebank Blast分析软件,它的N端序列与神经毒素具有高度的同源性。结论:这种碱性蛋白可能为神经毒素,但却拥有PLA2的活力。

英文摘要:

Objective: To purify and characterize a basic protein from Guangxi King cobra(Ophiophagus hannah) venom. Methods. Isolation and purification of a basic protein was done by successive chromatography on DEAE-Sepharose CL-6B, Sephadex G-75 and CM-Sepharose CL-6B column. The characterizations of this protein were studied by electrophoresis, phospholipase A2 activity analysis, amino acid analysis, N-terminal sequence analysis and pharmacology experiments. Result: A basic protein named CM-IV was isolated from Guangxi king cobra venom. Its relative molecular weight was 14 000, pI was 8.65, phospholipase A2 activity was 23μmol·mg^-1/min. Analysis of the amino acid showed that the percentage of Cys was 6.85%. N-terminal sequence was TKCYVTPDVK. This basic pr.otein has lethal activity(LD50≈0.2 mg/kg) for mouse. It exhibits cardiotoxic activities, but not anticoagulant activities. According Genebank Blast, we found that N-terminal sequence of this basic protein shares high amino acid homology with long neurotoxin. Conclusion: These results indicate that this protein maybe neurotoxin, but has weak phospholipase A2 activity.

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期刊信息
  • 《广西医科大学学报》
  • 北大核心期刊(2004版)
  • 主管单位:广西医科大学
  • 主办单位:广西医科大学
  • 主编:赵劲民
  • 地址:广西南宁市双拥路22号
  • 邮编:530021
  • 邮箱:gxykdxb@163.com
  • 电话:0771-5358454
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-930X
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1211/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 全国高校自然科学优秀学报,广西优秀科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版)
  • 被引量:21818