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IL-24重组载体的构建及其联合化疗药物对SKOV3细胞中TUBB3与ERCC-1基因表达的影响
  • ISSN号:0251-0790
  • 期刊名称:《高等学校化学学报》
  • 时间:0
  • 分类:O629[理学—有机化学;理学—化学] R737.31[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]吉林大学第二医院,长春130021, [2]吉林大学药学院,长春130021
  • 相关基金:国家自然科学基金(批准号:81272875); 吉林省科技厅项目(批准号:20140204023YY)资助
中文摘要:

通过基因重组技术将白介素24(IL-24)基因片段分别克隆成pc DNA3.0-OSP-1-IL-24和pc DNA3.0-IL-24载体,利用逆转录PCR(RT-PCR)测定2种载体的表达.将2种化疗药物紫杉醇(PTX)与顺铂(DDP)分别作用于正常SKOV3细胞及pc DNA3.0,pc DNA3.0-IL-24,pc DNA3.0-OSP-1和pc DNA3.0-OSP-1-IL-24稳定转染SKOV3细胞(卵巢癌细胞株),通过噻唑蓝(MTT)法检测化疗药物联合IL-24基因对细胞的杀伤效果及细胞的增殖能力,应用实时荧光定量PCR技术检测人β-微管蛋白3(TUBB3)与核苷酸切除修复交叉互补基因位1(ERCC1)基因在各组细胞中的表达.RT-PCR检测结果显示,通过基因重组技术克隆了pc DNA3.0-IL-24与pc DNA3.0-OSP-1-IL-24载体,IL-24基因能提高SKOV3细胞对化疗药物顺铂和紫杉醇的敏感性.其联合化疗药物对肿瘤药物的IC50值分别下降了10倍和6倍,TUBB3和ERCC1基因在IL-24基因转染的SKOV3细胞内的表达水平与在正常SKOV3细胞内相比,分别下降4倍和10倍多.上述结果表明,IL-24联合化疗药物可明显下调TUBB3与ERCC1基因的表达,该实验为临床治疗卵巢癌提供了重要的理论依据.

英文摘要:

Gene fragments of IL-24 were cloned into pc DNA3.0-OSP-1-IL-24 and pc DNA3.0-IL-24 vector using gene recombination technology,the expression of two vectors was measured by RT-PCR methods.The two chemotherapy drugs of paclitaxel and cisplatin were applied into normal SKOV3 cells,stable transfected SKOV3 cells of pc DNA3.0,Pc DNA3.0-IL-24,pc DNA3.0-OSP-1 and pc DNA3.0-OSP-1-IL-24,respectively.The cell killing effect and proliferation ability of IL-24 in combination with chemotherapy drugs were detected by 3-(4,5)-dimethylthiahiahiazo-(z-yl)-2,5-di-phenytetrazolium bromide(MTT) in SKOV3 cells.Gene expression of TUBB3 and ERCC-1 were detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction(PCR) technology in cell of each group.RT-PCR results showed that the pc DNA3.0-IL-24 and pc DNA3.0-OSP-1-IL-24 vector were cloned successfully by gene recombination technology.IL-24 gene can increase the sensitivity of SKOV3 cells to chemotherapeutic drug of cisplatin and paclitaxel.Its combination with chemotherapy drugs for IC50 of tumor drugs decreased 10 times and 6 times,respectively.Gene expression of TUBB3 gene and ERCC-1 decreased 4 times and 10 times,respectively.These results suggested that IL-24 in combination with chemotherapy drugs could reduce gene expression of TUBB3 and ERCC-1.This experiment provided an important theory basis for the clinical treatment of ovarian cancer.

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期刊信息
  • 《高等学校化学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学 南开大学
  • 主编:周其凤
  • 地址:吉林大学南胡校区
  • 邮编:130012
  • 邮箱:cjcu@jlu.edu.cn
  • 电话:0431-88499216
  • 国际标准刊号:ISSN:0251-0790
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1131/O6
  • 邮发代号:12-40
  • 获奖情况:
  • 首届及第二届国家期刊奖,连续两届“百种中国杰出学术期刊”,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:50676