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辣椒轻斑驳病毒的分子杂交检测
  • ISSN号:1007-1032
  • 期刊名称:《湖南农业大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:S432.4[农业科学—植物病理学;农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(J1210053)
中文摘要:

为探索辣椒轻斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMoV)的分子杂交技术检测方法,以感病辣椒叶片为试材,用改良CTAB法从辣椒叶片中提取总核酸,运用RT-PCR技术扩增出PMMoV特异片段。以带有PMMoV特异片段的质粒DNA为模板,以用PCR技术制备的地高辛标记PMMoV cDNA探针检测PMMoV。结果表明:11干燥叶片、新鲜叶片中提取的总核酸稀释80、640倍(相当于12.5、1.60μg叶片)后仍可检测到其中的PMMoV;干燥叶片利于保存及长距离转运,利于对大批量样品进行集中检测;2)采用快速提取法提取叶片总核酸,可从稀释80倍(约12.5gg叶片)的总核酸样品中检测到PMMoV。该技术体系可基本满足常规检测试验的需要。

英文摘要:

To develop a diagnosis system for detection pepper mild mottle virus (PMMoV) via molecular hybridization, total nucleic acid was extracted with modified CTAB method from pepper leaves infected by PMMoV, and the specific fragment was amplified using RT-PCR technology. PMMoV was detected by adopted the plasmid DNA from specific fragment of PMMoV as template, and the PMMoV-cDNA labeled with digoxigenin prepared via PCR as probe. The results indicated that: 1) PMMoV could be even detected from the total nucleic both diluted to 80-fold (amount to 12.5 μg leaves) for dry leaves and 640-fold (amount to 1.6 μg leaves) for fresh leaves. Easy conservation and long distance transport for dry leaves were advantageous to perform centralized detection for collected samples in bulk; 2) nucleic acid extracted using the rapid method from pepper leaves could be diluted to 80-fold (amount to 12.5 μg leaves) for PMMoV detection. The diagnostic system could meet the need of routine detection of PMMoV.

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期刊信息
  • 《湖南农业大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:湖南农业大学
  • 主办单位:湖南农业大学
  • 主编:官春云
  • 地址:长沙市芙蓉区农大路1号
  • 邮编:410128
  • 邮箱:zkb4618035@hunan.edu.cn
  • 电话:0731-84618035
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-1032
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1257/S
  • 邮发代号:42-157
  • 获奖情况:
  • 2006、2008、2010年连续三届全国高校精品科技期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,英国科学文摘数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:17328