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弓形虫profilin蛋白基因的克隆表达及序列分析
  • ISSN号：1673-4696
  • 期刊名称：中国兽医科学
  • 时间：2015.1.20
  • 页码：1-7
  • 分类：S852.7[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构：[1]华南农业大学兽医学院, [2]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室, [3]福建农林大学动物科学学院
  • 相关基金：国家自然科学基金资助项目(31228022,31172316);甘肃省创新研究群体计划项目(1210RJIA006)
  • 相关项目：不同基因型弓形虫差异表达蛋白质的鉴定及功能预测
作者： 张念章|胡玲英|朱兴全|翁亚彪|
关键词： 弓形虫, profilin蛋白基因, 遗传变异, 序列分析, 原核表达, B细胞抗原表位
中文摘要：

为研究弓形虫profilin(prf)蛋白基因的遗传变异规律和表达产物的反应原性,以9个来源于不同宿主和地方的弓形虫虫株基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增该基因并测序。将测序结果与从ToxoDB网站下载的4株弓形虫序列一起进行比对分析,用最大简约法绘制系统发育树。再以弓形虫RH株虫体总RNA为模板,使用RT-PCR方法扩增prf基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,转化入表达菌BL21(DE3)后,使用IPTG进行诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。同时,将弓形虫RH株prf基因编码区序列翻译成氨基酸序列,利用生物信息学软件对其亲疏水性、跨膜结构域、二级结构及B细胞抗原表位进行分析。结果显示,9个弓形虫虫株的prf基因长度均为3 552bp,一致性大于99.5%。系统发育树分析表明,弓形虫虫株的聚类没有规律。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,Profilin蛋白的分子质量约为30ku,且反应原性较好。蛋白结构预测结果显示,该蛋白含有4个亲水区,无跨膜区,7个α螺旋,8个β折叠,4个β转角,2个无规则卷曲和7个线性B细胞抗原表位。本研究结果表明,弓形虫prf基因可作为抗弓形虫疫苗候选分子。

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期刊信息
  • 《中国兽医科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 主编：殷宏
  • 地址：兰州市盐场堡徐家坪1号
  • 邮编：730046
  • 邮箱：zgsykx@zgsykx.com
  • 电话：0931-8310086 8342195
  • 国际标准刊号：ISSN：1673-4696
  • 国内统一刊号：ISSN：62-1192/S
  • 邮发代号:54-33
  • 获奖情况:
  • 2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘（网络版）,英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）
  • 被引量:6141