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普氏立克次体重组表面蛋白制备和免疫印迹抗原特异性分析
  • ISSN号:1002-2694
  • 期刊名称:《中国人兽共患病学报》
  • 时间:0
  • 分类:R376[医药卫生—病原生物学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中南大学基础医学院微生物学系,长沙410013, [2]军事医学科学院微生物流行病研究所,病原生物生物安全国家重点实验室,北京100071
  • 相关基金:国家基础研究计划(973计划课题2010CB530200/2010CB530205)资助
中文摘要:

目的克隆与表达普氏立克次体(Rickettesia prowazekii)主要蛋白抗原基因,分析所表达重组蛋白的抗原特异性。方法采用PCR法从普氏立克次体全基因组中扩增其主要抗原基因,将扩得的基因片段插入原核表达质粒;将基因重组表达质粒转化大肠杆菌,用IPTG诱导转化菌表达重组蛋白。将普氏立克次体、莫氏立克次体、立氏立克次体、恙虫病东方体、黑龙江立克次体、贝氏柯克斯体等实验感染小鼠血清与重组蛋白做免疫印迹。结果经过PCR扩增后获得9个目的基因片段,用其构建出9个原核表达质粒;9个原核表达质粒转化菌均高效表达出相应的重组蛋白;结果显示FtsZ、GroEI。Rp828、EF—Ts等4个蛋白特异性最好,仅与普氏立克次体感染小鼠血清反应;其次是Omp,它除与普氏立克次体感染小鼠血清反应外,仅与莫氏立克次体感染血清反应。结论FtsZ等4个重组蛋白为普氏立克次体的特异性抗原,可以作为研制流行性斑疹伤寒血清学诊断试剂的候选抗原。

英文摘要:

The objective of the present study is to prepare recombinant proteins of the major protein antigens of Rickette- sia prowazekii (Rp) and to analyze their specificity in serological diagnosis of the rickettsial infection. The genes encoding 8 surface proteins of Rp were amplified from its genomic DNA by polymerase chain reaction and the gene fragments were ex- pressed in E. coli cells by molecular clone approaches. The resulting recombinant proteins were analyzed with sera from mice experimentally infected with R. prowazekii, R. mooseri, R. rickettsii, R. heilongjiangensis, Oreintia tsutsugarnushii, or Coxiella burnetii in immunoblotting. As a result, four proteins, FtsZ, GroEL, Rp828, and EF Ts, reacted with only R. prowazekii--infected sera and Omp reacted with the sera from mice infected with R. mooseri besides R. prowazekii. The result suggests that the four surface proteins are highly specific for R. prowazekii--infected sera and candidateantigens for se- rological diagnosis of R. prowazekii infection.

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期刊信息
  • 《中国人兽共患病学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国微生物学会
  • 主编:严延生
  • 地址:福州市津泰路76号
  • 邮编:350001
  • 邮箱:rsghb@fjcdc.com.cn
  • 电话:0591-87552018
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-2694
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1284/R
  • 邮发代号:34-46
  • 获奖情况:
  • 中国基础医学核心期刊,中国生物医学核心期刊,中国科学引文数据库列为来源期刊及统计源,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9000