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甜菜ISSR-PCR反应体系的优化
  • ISSN号:1007-2624
  • 期刊名称:《中国糖料》
  • 时间:0
  • 分类:S566.301[农业科学—作物学] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]内蒙古农业大学,呼和浩特010018, [2]内蒙古自治区农牧业科学院甜菜研究所,呼和浩特010031
  • 相关基金:国家自然科学基金(30760125).
中文摘要:

以甜菜基因组DNA为模板,研究了ISSR的主要影响因素,建立一套适宜于甜菜的ISSR优化反应体系及程序,并对该优化体系进行了验证。实验结果表明:①优化的ISSR扩增的反应体系为:20μL的反应体积中包括2.5mmol/L MgCl2,0.25mmol/L dNTPs,1.5U Taq DNA聚合酶,0.5μmol/L引物,10×PCR Buffer 2μL,100ng DNA模板。②优化的PCR扩增条件为:94℃变性3min,然后94℃变性30s,45℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环后,72℃延伸5min。③利用优化的反应体系仅用1条引物就能将10份甜菜材料区分开。

英文摘要:

The main effect factors to sugarbeet ISSR were tested using DNA genome template, to build and identify the optimized ISSR reaction system and program which was suit to sugarbeet. The results showed that the optimized ISSR augmentation reaction system made up of MgCl2 2.5 mmol/L, dNTPs 0.25 retool/L, DNA polymerase 1.5 U Taq, primer 0.5μmol/L, Buffer 2 μL 10×PCR, DNA stencil 100 ng. The optimized condition was 3 rain pre-denaturization at 94℃, then 30s denaturalization 94℃, 30s annealing at 45℃, 1 min extension at 45℃, after 35 cycles, 5 min extension at 72℃. Ten sugarbeet varieties could be separated by one primer.

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期刊信息
  • 《中国糖料》
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院甜菜研究所
  • 主编:陈连江
  • 地址:哈尔滨市南岗区学府路74号
  • 邮编:150080
  • 邮箱:sugarcrop@163.com
  • 电话:0451-86609497
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-2624
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1406/S
  • 邮发代号:14-69
  • 获奖情况:
  • 国家优秀科技期刊三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘
  • 被引量:3535