位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
变性梯度凝胶电泳在环境微生物研究中的应用详解
  • ISSN号:1007-4333
  • 期刊名称:《中国农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q-33[生物学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学农学与生物技术学院,北京100094, [2]黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30571088)
中文摘要:

结合笔者等多年积累的经验详细介绍环境微生物学研究中变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术应用全步骤:从环境样品中直接提取总DNA。利用5’端含GC夹子的引物PCR16SrDNA的部分片段,将PCR产物在含有浓度线形递增的变性剂的聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳分析,使不同来源的DNA片段在电泳胶中分离,从胶中切出分离的DNA片段测定碱基序列,进行分类分析。PCR—DGGE技术能够检测不可培养的微生物基因,而DGGE技术与克隆等其他技术结合更能发挥其分离作用。

英文摘要:

The aim is to introduce detailed procedures for the application denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) in the study of environmental microorganisms based on our current experience in molecular ecology, The procedure for DGGE includes.. Extracting DNA directly from environmental samples; PCR in the region of 16S rDNA using a primer with GC clamp in 5'; analyzing the PCR products in a polyacrylamide get with a chemical denaturing gradient which could separate the different DNA fragments and then extracting bands from the gel and performing sequencing and phylogenetic analysis. PCR-DGGE could detect the gene of unculturable microoganisms, and the combination of DGGE with clone library and other molecular techniques is more appropriate to exert its predominance in separating DNA.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国农业大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:中国农业大学
  • 主编:李保国
  • 地址:北京海淀区圆明园西路2号
  • 邮编:100094
  • 邮箱:xuebao@cau.edu.cn
  • 电话:010-62732619
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-4333
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3837/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21575