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酶联免疫吸附法检测除草剂异丙甲草胺
  • ISSN号:1002-6630
  • 期刊名称:《食品科学》
  • 时间:0
  • 分类:TS201.6[轻工技术与工程—食品科学;轻工技术与工程—食品科学与工程]
  • 作者机构:[1]农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室,广东省食品质量安全重点实验室,广东广州510642, [2].华南农业大学理学院,生物材料研究所,广东广州510642
  • 相关基金:公益性行业(农业)科研专项(201003008-08); 国家自然科学基金面上项目(30700663;21105030); 广东省科技计划项目(2010A032000001-4); 福建省科技计划重点项目(2012Y0003)
中文摘要:

将异丙甲草胺与3-巯基丙酸反应合成出带羧基的异丙甲草胺半抗原MMPA;用活泼酯法将半抗原与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)分别偶联,制备免疫抗原MMPA-BSA和包被抗原MMPA-OVA,紫外光谱鉴定后用MMPA-BSA免疫新西兰大白兔,成功制备出抗异丙甲草胺多克隆抗体,并建立异丙甲草胺的间接竞争酶联免疫吸附分析(icELISA)法。该方法半抑制浓度(IC50)为34.3ng/mL,检测限(IC10)为6.3ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为12.3~99.2ng/mL。该抗体对其他结构类似物无明显交叉反应。将该方法应用于环境水样中异丙甲草胺检测,回收率在89.5%~107.9%之间,相对标准偏差9.2%~14.5%。所建立的异丙甲草胺免疫分析方法特异性强、准确度高、灵敏度高,可用于环境水样中异丙甲草胺的快速检测。

英文摘要:

Using one step reaction,metolachlor was modified with 3-marcapropanoic acid(3-MPA) to obtain the hapten 3-(2-((2-ethyl-6-methylphenyl)(1-methoxypropan-2-yl)amino)-2-oxoethylthio)propanoic acid(MMPA),which was then coupled to bovine serum albumin(BSA) as immunogen(MMPA-BSA) and ovalbumin(OVA) as coating antigen(MMPAOVA) using active ester method,respectively.New Zealand rabbits were immunized with MMPA-BSA.Based on the obtained polyclonal antibody,an indirect competitive ELSIA(icELISA) was developed successfully for the detection of metolachlor and demonstrated excellent performance.The 50% inhibition concentration(IC50) was 34.3 ng/mL and the detectable range(IC20–IC80) was 12.3–99.2 ng/mL,while the limit of detection(LOD,IC10) was 6.3 ng/mL.The antibody showed low cross-reactivity(10.9%) towards S-(-)-metolachlor.However,no significant cross-reactivity towards other structurally related compounds was found.The recoveries of spiked samples were in the range of 89.5%–107.9% with RSD ranging from 9.2% to 14.5%.Our results indicated that the proposed icELISA method is highly specific,sensitive,accurate and suitable for the rapid detection of herbicide metolachlor in water samples.

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期刊信息
  • 《食品科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国商业联合会
  • 主办单位:北京市食品研究所
  • 主编:孙勇
  • 地址:北京西城区禄长街头条4号
  • 邮编:100050
  • 邮箱:foodsci@126.com
  • 电话:010-83155446-8006
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-6630
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2206/TS
  • 邮发代号:2-439
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,1986年原商业部重大成果三等奖,1997年国内贸易部优秀科技期刊三等奖,第三届中国出版政府奖提名奖,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国工程索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:115579