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恶性疟原虫融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体制备及功能分析
  • ISSN号:1000-7423
  • 期刊名称:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R382.312[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学] R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第二军医大学病原生物教研室,上海200433
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.30430610)致谢在细胞融合实验方面得到本室朱淮民教授和张瑞娟硕士的指导和帮助.周爱国和黄玉富同志在蛋白纯化方面提供帮助,
中文摘要:

目的制备恶性疟原虫(FCC1/HN株)融合抗原PfCP-2.9的单克隆抗体,分析其生物学特性及功能。方法用PfCP-2.9免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞及SP2.0骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG1500)作用下进行融合,制备单克隆抗体.并分析其特性。结果获得1株能分泌抗PfCP-2.9的小鼠杂交瘤细胞株单克隆抗体F12D,经免疫球蛋白类型和亚类鉴定为IgG1。ELISA和蛋白质印迹法(Western blotting)显示单克隆抗体F12D能与PfCP-2.9发生特异性反应.F12D所识别的PfCP-2.9抗原表位不能耐受还原剂巯基乙醇,表明F12D识别的是构象表位。间接免疫荧光试验(IFA)显示F12D可识别培养的FCC1/HN。体外抑制试验结果显示,F12D终浓度为0.3mg/ml时,对FCC1/HN的抑制率为56%。结论单克隆抗体F12D能与PfCP-2.9发生特异性反应,其所识别表位为构象表位,F12D可识别体外培养的FCC1/HN,并对其生长具有抑制作用。

英文摘要:

Objective To prepare and characterize monoclonal antibody against a malaria vaccine candidate, PfCP-2.9 chimeric protein of Plasmodium falciparum. Methods BALB/c mice were immunized with PfCP-2.9, and the spleen cells were used for fusion with SP2/0 cells. The monoclonal antibodies were analyzed by EL1SA, Western blotting as well as growth inhibition assay. Result A monoclonal antibody was obtained. It interacted with the PfCP- 2.9 recombinant protein by ELISA and Western blotting. The interaction of the monoclonal antibody with the protein was reduction-sensitive, indicating that the antibody recognized a conformational epitope. Moreover, the antibody also recognized the cultured parasites of P.falciparum by indirect immunofluorescent antibody test (IFA). When tested by growth inhibition assay, the antibody significantly inhibited parasite growth in vitro of 56% inhibition rate at the antibody concentration of 0.3 mg/ml. Conclusion A monoclonal antibody against PfCP-2.9 malaria vaccine candidate has been obtained, which recognizes a conformational epitope of the protein and natural protein.

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期刊信息
  • 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
  • 主编:汤林华
  • 地址:上海市瑞金二路207号右楼3F
  • 邮编:200025
  • 邮箱:zgjsczz@vip.163.net
  • 电话:021-54562376
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-7423
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1248/R
  • 邮发代号:4-362
  • 获奖情况:
  • 1997年被中华预防医学会评为先进编辑部,2000年荣获中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,2001年荣获中华预防医学会2001年优秀期刊二等奖,2003年荣获2001-2002年中华预防医学会系列杂志优...,2009年获“百种中国杰出学术期刊”奖,2010年荣获上海市科技期刊审计优秀奖,2011年遴选为第二届“中国精品科技期刊”,获第三届“RCCSE中国权威学术期刊”,2013年荣获国家卫生计生委首届优秀期刊,2013年荣获第四届华东地区优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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