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华细辛AFLP反应体系的建立和优化
  • ISSN号:0253-2670
  • 期刊名称:中草药
  • 时间:0
  • 页码:625-629
  • 语言:中文
  • 分类:R282.21[医药卫生—中药学;医药卫生—中医学]
  • 作者机构:[1]上海交通大学药学院,上海200240, [2]郑州大学生物工程系,河南郑州450001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30772725)
  • 相关项目:华细辛品质、遗传变异及与环境影响因子相关性的分析
中文摘要:

目的建立优化的华细辛Asarum sieboldii AFLP反应体系,为华细辛遗传多样性的研究提供技术支持。方法以华细辛叶片为材料,对基因组DNA提取、酶切连接、PCR扩增等操作过程中各关键因素进行分析,筛选最适条件,建立完善的AFLP反应体系。结果建立了优化的华细辛AFLP分析体系:在基因组DNA提取时,提取液中添加巯基乙醇、样品温浴时间为30min;Trul I和Pst I的酶切时间分别为3h;在扩增反应中,Mg^2+终浓度为1.5mmol/L、TaqDNA聚合酶用量为0.2μL。结论本反应体系可获得良好的AFLP分析结果,可用于华细辛遗传多样性研究。

英文摘要:

Objective To establish and optimize AFLP reaction system used in providing necessary technique basis for genetic diversity analysis in Asarurn sieboldii. Methods Leaves of A. sieboldii were used as experimental materials to analyze various essential elements of the whole process, such as quality of extracted DNA, time of restriction digest and ligation, concentration of Mg^2+ , primers and Taq DNA polymerase during PCR amplification etc. , so that the most optimal AFLP reaction system could be built up. Results The optimal AFLP reaction system of A. sieboldii has been constructed, in the genomic DNA extraction, mercaptoethanol being utilized and samples being incubated about 30 min at 65 ℃. the genomic DNA being digested by Trul I and Pst I for 3 h respectively; in PCR amplification, the final concentration of Mg^2+ being 1.5 mmol/L and the volume of Taq DNA polymerase being 0.2 μL. Conclusion The present reaction system for A. sieboldii is able to gain the favorable results of AFLP analysis and can be used in the genetic diversity research of the species.

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期刊信息
  • 《中草药》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:天津市科委
  • 主办单位:中国药学会 天津药物研究院
  • 主编:汤立达
  • 地址:天津市南开区鞍山西道308号
  • 邮编:300193
  • 邮箱:zcy@tiprpress.com
  • 电话:022-27474913 23006821
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2670
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1108/R
  • 邮发代号:6-77
  • 获奖情况:
  • 国家期刊奖,国家“双奖”期刊,1992年获国家科委、中共中央宣传部、国家新闻出版...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国国际药学文摘,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:90909