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人脐带内皮祖细胞的分离、鉴定及转染EGFP质粒的实验研究
  • ISSN号:1673-4181
  • 期刊名称:国际生物医学工程杂志
  • 时间:2012.2.28
  • 页码:42-45
  • 分类:R318[医药卫生—生物医学工程;医药卫生—基础医学] Q813[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所 天津市生物医学材料重点实验室,天津300192
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(81100100);天津市自然科学基金面上项目(10JCYBJC10600);教育部新教师基金项目(20091106120048)
  • 相关项目:TFPI基因修饰内皮祖细胞靶向多途径防治血管再狭窄的实验研究
作者: 朱敦皖|
中文摘要:

目的从脐带中分离内皮祖细胞(EPCs),考察其体外增殖、基因转染绿色荧光蛋白质粒的行为。方法以酶消化法从脐带中分离出内皮祖细胞,并通过流式细胞仪和共聚焦显微镜对内皮祖细胞进行鉴定,以Lipofectamine2000为转染试剂考察了内皮祖细胞转染绿色荧光蛋白质粒的行为。结果从脐带中分离培养的内皮祖细胞在第9天形成了典型的内皮细胞集落,流式细胞仪分析结果显示CD133和激酶插入区受体(KDR)的含量均有所提高,并具有内皮祖细胞结合异硫氰酸荧光素(FITC)标记的荆豆凝聚素1(FITC—UEA-1)和吞噬DiI标记的低密度脂蛋白(DiI—ac—LDL)的功能,能较好地表达绿色荧光蛋白。结论从脐带中分离的内皮祖细胞体外在适当的培养条件下,可增殖、诱导分化为内皮细胞,并能较好地表达外源基因,是基因与细胞治疗理想的载体。

英文摘要:

Objective To isolate and identify endothelial progenitor cells (EPCs) from human umbilical cord, and to study the cell proliferation and gene transfection of green fluorescent protein plasmid in vitro. Methods EPCs were isolated from human umbilical cord in enzyme digestion method. The biological characteristics of EPCs were identified by flow cytometry and laser eonfoeal microscope. The enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene transfection mediated by EPCs was investigated using Lipofeetamine 2000 as transfeetion reagent. Results Endothelial progenitor cells isolated from umbilical cord formed typical endothelial cell colony 9 days later. These cells displayed an improved positive expression of CD133 and kinase insert domain receptor (KDR). The endothelial- lineage characteristics of expanded cells were confirmed by fluorescein isothiocyanate (FITC)-UEA-1 binding and DiI- ac-LDL uptake assay with the aid of laser confoeal microscope. The transfection results demonstrated high expression of EGFP taking EPCs as host cell. Conclusion Endothelial progenitor cells isolated from umbilical cord can be propagated and induced to differentiate into endothelial cells in the appropriate culture conditions. EPCs demonstrated to be an ideal carrier for gene and cell therapy.

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期刊信息
  • 《国际生物医学工程杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国医学科学院生物医学工程研究所 中华医学会
  • 主编:
  • 地址:天津市南开区白堤路236号
  • 邮编:300192
  • 邮箱:guobjb@aliyun.com
  • 电话:022-87892617 87893233
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-4181
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1382/R
  • 邮发代号:18-86
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版)
  • 被引量:1188