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籼粳稻对农杆菌遗传转化反应的差异及提高转化率的研究
  • 期刊名称:湖南农业大学学报(自然科学版),2007,33(4):386-390
  • 时间:0
  • 分类:S511[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]湖南农业大学水稻基因组学实验室,湖南长沙410128, [2]湖南农业大学农学院,湖南长沙410128, [3]湖南农业大学生物安全科学技术学院,湖南长沙410128, [4]美国俄亥俄州立大学植物病理学系,哥伦布43210
  • 相关基金:国家自然科学基金(30571063,30470990);湖南农业大学"芙蓉学者"计划;湖南省教育厅科学研究重点项目(04A024,05B028);湖南省杰出青年基金(06JJ10006)
  • 相关项目:新广谱抗稻瘟病基因的分子克隆与功能鉴定
中文摘要:

通过对粳稻品种日本晴及5个籼稻品种的研究,发现籼稻、粳稻在成熟胚愈伤组织培养、农杆菌遗传转化的最适条件方面存在差异.在MS,CC,NB培养基上,日本晴的愈伤组织诱导率达86.37%以上,远高于各籼稻品种;与农杆菌液的共培养时间,籼、粳稻均以3 d为宜;转化后的籼稻抗性愈伤组织用40 mg/L的潮霉素筛选效果较好,日本晴则需用50 mg/L的潮霉素筛选;幼苗生根阶段,籼稻的潮霉素适宜质量浓度为20~30 mg/L,日本晴的潮霉素适宜质量浓度为50 mg/L;日本晴的gus基因瞬时表达率强于各籼稻品种,hpt基因转化率也高于各籼稻品种.

英文摘要:

Different response to A.tumefaciens-mediated transformation of Nipponbare(japonica rice) and five indica rice isolates were investigated. The results are asfollows : the inducement rate of Nipponbare reached 86.37%, on MS, CC, NB medium significantly higher than that of the indica rice isolates examined. For both indica and japonica variety, co-culture with tumefaciens for 3 days was beneficial to the target gene's transformation; 40 mg/L hygromycin could be used for selection of indica rice transformants selection, but 50 mg/L was needed for Nipponbare; 20 - 30 mg/L hygromycin is beneficial for selecting positive transplants of incica rice, and 50 mg/L for Nipponbare; Gus gene transient expression of Nipponbare and hpt gene transformation efficiency were better than that ofindica isolates.

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