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布鲁氏菌VirB5基因的原核表达及生物信息学分析
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q93-337[生物学—微生物学]
  • 作者机构:石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(“布鲁氏菌外膜蛋白OMP25对宿主细胞自噬/凋亡信号通路的调控机制研究”,No.31460650)和(“TceSR和TcfSR在布鲁氏茵致病过程中的分子调控机制研究”,No.31572491)
中文摘要:

[目的]获得高效表达并且抗原性较好的VirB5蛋白,并分析其生物信息学功能。[方法]以羊种布鲁氏菌16M基因组为模板扩增VirB5基因,连接表达载体pET-32a,并转化至大肠杆菌(DE3)中表达,用SDS—PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用信息生物学方法对VirB5基因编码蛋白的理化性质、结构、保守结构域进行分析。[结果]成功克隆出VirB5基因,并在大肠杆菌中成功表达,SDS—PAGE和Western Blot证实表达重组蛋白对布鲁氏菌阳性血清具有反应原性,生物信息学方法推测VirB5基因可能在胞内运输功能方面发挥重要作用。[结论]成功克隆出717bp大小的VirB5基因,并在大肠杆菌中成功表达45kDa大小的蛋白,具有良好的抗原性,且证明VirB5蛋白与布鲁氏菌的胞内运输相关。

英文摘要:

[ Objective] To get high expression and better antigenic protein VirB5, And to analyze its bioinformatics function. [ Methods] Brucella melitensis 16 M genome as a template to amplify VirB5 gene, connected the pET- 32a expression vector, and transformed into E. coli( DE3), detection of immunological properties by SDS - PAGE and Western Blot. VirB5 protein - coding genes were analyzed by biological information methods on the use of physical and chemical properties, structure, and conserved domain. [ Results ] VirB5 gene was successfully cloned and highly expressed in E. coli, SDS - PAGE and Western Blot confirmed the expression of recombinant proteins of Brucella positive serum has reactogenicity, VirB5 protein might play an important role in biology and molecular function. [ Conclusion] The 45 kDa VirB5 protein was successful expression in E. coli, which has good antigenicity and the VirB5 protein was associated with the intracellular transport of Brucella.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503