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草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立
  • ISSN号:1009-9980
  • 期刊名称:果树学报
  • 时间:0
  • 页码:60-65
  • 语言:中文
  • 分类:S668.4[农业科学—果树学;农业科学—园艺学]
  • 作者机构:[1]北京农学院植物科学技术系,北京102206, [2]中国林业科学研究院林业研究所,北京100091, [3]国家林业局林木培育重点实验室,北京100091, [4]中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划-“863”计划(2007AA102182);国家自然科学基金(30671698);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(200701);北京市教委植物遗传育种改良与种质资源创新平台(5075201029)
  • 相关项目:红豆杉细胞微小RNA基因的表达及其对紫杉醇生物合成相关基因调控作用的分析
中文摘要:

将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane 13α—hydroxylase,130H)基因全长cDNA正向插入到pCAMBI-A1304,构建其植物表达载体pCT130H;将水稻小RNA 169d(microRNA 169d,miRNA 169d)基因前体(precursor)全长DNA正向插入到pCAMBIA1305.1.构建其植物表达载体pC0169d。用电击法把它们导人根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株。用1mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragariaxananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达。对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12h和0.5mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因130H和调节基因miRNA 169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功。

英文摘要:

The amplified full-length cDNA for Taxane 13α-hydroxylase (13OH) from Taxus cuspidata was inserted into pCambia1304 and a recombinant contstrnct pCT13OH was produced. In addition, the DNA for precursor of rice microRNA 169d (miR169d) gene was inserted into pCambia1305.1 and a recombinant contstrnct pCO169d was obtained. The recombinant plasmids pCT13OH and pCO169d were transformed into Agrobacterium tumefaciens GV3101 by electroporation. Furthermore, the transformation of these two engineered A. tumefaciens strains with strawberry were studied by injecting their overnight culture into strawberry(Fragariaxancalassa)fruit. GUS expression was monitored by histochemical assay of the cross section of strawbelxy fruit. The effect of injection position, culture duration and injection volume of engineered A. tumefaciens on GUS expression were studied. Fruit at the stage of two weeks post-pollination were the best materials for transient expression study. The best injection position, culture duration and injection volume of engineered A. tumefaciens was postion near pedicel, 12 h and 0.5 mL respectively. We anticipate that this rapid and transient expression system will be useful for studying the function of plant structural genes and regulatory genes including 130H and miR169d.

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期刊信息
  • 《果树学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:农业部
  • 主办单位:中国农业科学院郑州果树研究所
  • 主编:王志强
  • 地址:河南省郑州市航海东路南中国农业科学院郑州果树研究所
  • 邮编:450009
  • 邮箱:chinagsxb@163.con
  • 电话:0371-65330928 653387308
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-9980
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1308/S
  • 邮发代号:36-93
  • 获奖情况:
  • 获河南省优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:18699