[目的]从人胰腺癌细胞系BxPC-3中分离并鉴定胰腺癌干细胞。[方法]用无血清培养基培养人胰腺癌BxPC-3得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,观察各传代后细胞成球能力:并用含血清培养基诱导促使其分化;蛋白印迹法测定肿瘤干细胞特异性转录因子0CT-4蛋白表达情况.并将肿瘤细胞球细胞植入NOD/SCID小鼠皮下,观察移植瘤的形成。『结果]在无血清培养基中,BxPC-3细胞能形成少量肿瘤细胞球,具有很强的自我更新能力,成球能力随着球体细胞传代次数的增加而增加。在含血清环境中,球体细胞逐渐分化而呈贴壁生长。肿瘤细胞球0CT-4蛋白表达明显高于BxPC-3贴壁细胞。1×10^4个球体细胞即能在NOD偈CID小鼠皮下成瘤。[结论]无血清培养能够有效的分离和扩增人胰腺癌细胞系BxPC-3的肿瘤干细胞。