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屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定
  • ISSN号:1671-7236
  • 期刊名称:《中国畜牧兽医》
  • 时间:0
  • 分类:S852.61[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点试验室,农业部草食动物疫病重点开放试验室,兰州730046
  • 相关基金:国家自然科学基金(31172335)
中文摘要:

为提取纯化屎肠球菌(E.faecium)荚膜多糖(CPS)并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶(25μg/mL)、脱氧核糖核酸酶(0.5mg/mL)、溶菌酶(0.25mg/mL)及蛋白酶K(1.25mg/mL)等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30ku和100ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。

英文摘要:

In order to extract and purify the capsular polysaccharide of Enterococcus faecium and measure contents of polysaccharide,high pressure crushing methods and enzyme decomposition methods(RNase A(25μg/mL),DNase(0.5mg/mL),lysozyme(0.25mg/mL)and protease K(1.25mg/mL))were used to remove the nucleic acids and proteins to obtain crude capsular polysaccharide,and centrifugal ultrafiltration with 30 and 100ku ultrafiltration centrifuge tubes and DEAE Sepharose Fast Flow column chromatography were also adopted to obtain the purified capsular polysaccharides of Enterococcus faecium.Then the content of polysaccharide was determined by the phenol-sulfuric acid method.The results showed the capsular polysaccharide content was75.21%.The results revealed that capsular polysaccharide of Enterococcus faecium was extracted successfully.The method of extracting capsular polysaccharide in Enterococcus faecium was established initially.

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期刊信息
  • 《中国畜牧兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 主编:李琍
  • 地址:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 邮编:100193
  • 邮箱:zgxmsy@caas.cn
  • 电话:010-62816020 62811226 62810371
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7236
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4843/S
  • 邮发代号:2-215
  • 获奖情况:
  • 1996年被农业部评为“95中国出版成就展”参展期刊...,1998年在首届全国畜牧兽医优秀科技期刊评比中总分...,2002年被中国期刊协会农业期刊分会和中国农学会评...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:22619