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农业废物堆肥中高产漆酶新菌株的分离鉴定及酶学性质研究
  • ISSN号:0250-3301
  • 期刊名称:环境科学
  • 时间:0
  • 页码:3220-3227
  • 分类:X172[环境科学与工程—环境科学]
  • 作者机构:[1]湖南大学环境科学与工程学院,长沙410082, [2]环境生物与控制教育部重点实验室(湖南大学),长沙410082
  • 相关基金:湖南省研究生创新项目;湖南省自然科学创新群体基金项目(10JJ7005);湖南省重大专项项目(2009FJ1010);国家自然科学基金项目(50908079,50978088)
  • 相关项目:基于基因多样性分析的堆肥过程中木质纤维素降解微生物群落结构与功能研究
中文摘要:

从农业固体废物堆肥中分离得到1株高产漆酶的新菌株,通过对其形态特征和ITS序列分析,鉴定该菌株为哈茨木霉(Hypocrea lixii).以Cu1AF和Cu2R为引物对该菌株的漆酶基因进行扩增,PCR产物回收克隆后测序得到长度为148 bp的漆酶基因片段.在液体培养条件下,菌株漆酶活力可达到67.5 U.mL^-1.对该菌株的漆酶酶学性质初步研究显示:漆酶相对分子质量大约为60×10^3,酶反应的最适温度为35℃,最适pH为4.0;在60℃时漆酶半衰期〉1 h;漆酶氧化2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)的米氏常数(Km)值为1.00 mmol.L^-1;金属离子对酶活的影响很大,Na+、Fe^2+、Fe^3+、Pb^2+、Zn^2+对酶活都有抑制作用.该菌株有很好的应用潜力来作农业废物堆肥处理系统的强化菌剂.

英文摘要:

A new fungal strain with high laccase production was isolated from the agricultural waste composting.It was identified as Hypocrea lixii based on morphological analysis and ITS sequence.The partial laccase gene of the new strain was successfully amplified using the primer pair Cu1AF and Cu2R.After purification and cloning of the PCR product,a 148 bp fragment of laccase gene was obtained.The laccase activity of the strain reached a peak value of 67.5 U·mL^-1 in liquid medium.The molecular mass of the purified laccase was determined to be about 60×10^3.The optimum temperature and pH for enzyme activity were 35℃ and 4.0,respectively.The half-time of the enzyme was more than 1 h at 60℃.Under standard assay conditions,Km values was 1.00 mmol·L^-1 towards ABTS.Laccase activity was inhibited by several metal ions,such as Na+,Fe^2+,Fe^3+,Pb^2+and Zn^2+.This strain has a good potential for application as a bioaugmentation strain in the agricultural waste composting system.

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期刊信息
  • 《环境科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生态环境研究中心
  • 主编:赵进才
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  • 邮编:100085
  • 邮箱:hjkx@rcees.ac.cn
  • 电话:010-62941102 62849343
  • 国际标准刊号:ISSN:0250-3301
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1895/X
  • 邮发代号:2-821
  • 获奖情况:
  • 在全国第一届和第二届优秀科技期刊评比中分别荣获...,二次荣获中国科学院优秀期刊评比一等奖,荣获中国期刊方阵双奖期刊荣誉
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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