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基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:Q51[生物学—生物化学] TQ467[化学工程—制药化工]
  • 作者机构:[1]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850, [2]国家体育总局运动医学研究所兴奋剂检测中心,北京100029
  • 相关基金:本文系国家自然科学基金(No.20275044, 20275046)、国家重点基础研究发展规划(No.2004CB520802, 2001CB510201)、北京市科技计划重大项目(No.H030230280190)和奥运科技专项课题(No.2002BA904B01, 2003BA904B05)资助项目
中文摘要:

建立了生物质谱研究rhEPO 一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO 样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全部N-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证,测定4个样品分子量分别为:27754.1±27.4Da、27941.4±23.2 Da、27682.5±22.0 Da和27914.7±22.5 Da;唾液酸含量分别为:5.0%、4.8%、5.6%和5.4%;糖含量分别为:34.3%、34.7%、34.1%和34.6%.此外还对4种产品在O-连接糖型及N-连接糖型上的区别做了初步探讨.

英文摘要:

A series of method for the primary structure determination of recombinant human erythropoietin (rhEPO), a recombinant glycoprotein, by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight-time of flight-mass spectrometry (MALDI-TOF-TOF-MS) was developed , which includes the methods of the measurement of molecular weight, content of sialic acid and carbohydrate in rhEPO etc. Based on the developed methods, four kinds of rhEPO coming from different manufactories were determined. The coverage of PMF of all rhEPOs reached 98% by optimization of digestion condition, and N-glycan site and two disulphide bridges in the rhEPOs were determined successfully. Molecular weight of four samples are (27754. 1 ± 27.4) Da, (27941.4 ±23.2)Da, (27682.5 ±22.0) Da and (27914.7 ±22.5) Da; content of sialic acid are 5.0%, 4. 8%, 5.6% and 5.4% ; and content of carbohydrate are 34.3%, 34.7% , 34.1% and 34.6%. Moreover, the difference of the glycan structure type on among these four rhEPOs was probed and discussed.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455