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水稻条纹病毒(RSV)外壳蛋白(CP)自身互作位点和亚细胞定位区域的鉴定
  • ISSN号:1674-7968
  • 期刊名称:《农业生物技术学报》
  • 时间:0
  • 分类:S432.1[农业科学—植物病理学;农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护] S432.4[农业科学—植物病理学;农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]福建农林大学植物保护学院/福建省植物病毒学重点实验室/福建农林大学植物病毒研究所,福州350002
  • 相关基金:国家重点基础研究发展规划(“973”计划)项目“稻飞虱成灾机理与可持续治理的基础研究”(2010cBl26203);转基因生物新品种培育重大专项“水稻重要细菌和病毒病害抗性调控基因及其元件的发掘和功能分析”(2009ZX08009-044B):国家“十二五”科技支撑计划项目“农林生物灾害防控关键技术研究与示范”(2012BADl9803);福建省教育厅科技项目“RGsV基因沉默抑制子对水稻miRNA代谢的影响”(JAll080):国家自然科学基会项目“水稻条纹病毒基因沉默抑制子与水稻OsSGS3互作机理”(31171821):福建省自然科学基金项目“WRKY基因在水稻抗条纹叶枯病中作用的研究”(2011J050511.
中文摘要:

为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的刀基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDESTl7上。将重组载体转化EcoliRosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29kDa含HIS标签的融合蛋白。以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到1:8192。并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blotELISA方法。为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础。

英文摘要:

P2 gene of Rice grassy stunt virus was amplified by RT-PCR from the infected rice leaves, and it was subcloned into prokaryote expression vector pDEST17 to construct recombinant expression plasmid, which then was transformed into E. coil Rosetta. The 29 kDa HIS6-tag fusion protein was obtained with induction of IPTG from E. coil Rosetta cells, which was used to immunize the healthy rabbits as an antigen. The antiserum of P2 protein was obtained after five times injections and the ELISA analyses showed that the potency of antiserum was 1:8192. Then, the antiserum was used to establish the Immunocapture RT-PCR and Dot-blot ELISA method to detect the RGSV. Therefore, the P2 protein and antiserum provided the technical support for the diagnosis of RGSV disease and protein function study.

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期刊信息
  • 《农业生物技术学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中国农业大学
  • 主编:武维华
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农大生命科学楼1053
  • 邮编:100193
  • 邮箱:nsjxb@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733684 62731615
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-7968
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3342/S
  • 邮发代号:2-367
  • 获奖情况:
  • 在《中国学术期刊评价研究报告》(2009-2010年)...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国乌利希期刊指南,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15081