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C型产气荚膜梭菌β1毒素基因表达
  • 期刊名称:生物技术,2004,14(5):17-18
  • 时间:0
  • 分类:S852[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医] Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]大连大学生物工程学院,辽宁大连116622, [2]宁夏大学生命科学学院,宁夏银川750021
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目 (“产气荚膜梭菌保护性抗原基因构架及免疫原性研究,No.30 360 0 80 )
  • 相关项目:产气荚膜梭菌保护性抗原基因的构建及免疫原性研究
中文摘要:

利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体DNA中扩增出β1毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamHI和EcoRI对其进行双酶切处理,回收0.95kb的β1毒素基因片段,最后将其定向克隆在事先经同样内切酶处理的载体pET-28c中相应位点上,转化至受体菌B121(DE3)qh。经BamHI和Eco RI双酶切鉴定和核苷酸序列测定证实,构建的重组质粒pETXBl含有B毒素基因,并且具有正确的基因序列和阅读框架。重组菌株BI21(DE3)(pETXB1)经IPIG诱导后,其表达产物经ELISA检测和SDS-PAGE分析,结果表明重组菌株可以高效表达β1毒素蛋白,该蛋白占菌体总蛋白相对含量的12.24%。

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