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FLT-1启动子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q784[生物学—分子生物学] R54[医药卫生—心血管疾病;医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院内分泌科,重庆400016, [2]第三军医大学附属新桥医院内分泌科,重庆400042
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30570744);教育部博士点基金(20050631009);教育部重点项目(KJ050314);重庆市教委基金(渝教科7号文)项目资助
中文摘要:

目的:为探索FLT-1启动子靶向调控活性分析,克隆FLT-1启动子基因序列,构建并鉴定肿-1启动子调控的荧光素酶报告基因重组体pGL3-FLT—Basic—luc。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增FLT-1启动子序列,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic—luc中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-FIT—Basic—luc,通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定。结果:通过酶切鉴定及基因测定证明,所克隆的基因产物与预期结果-致,序列无碱基突变。结论:成功构建了含有FLT-1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下-步分析该启动子活性及血管疾病的基因治疗奠定基础。

英文摘要:

Objective: To evaluate FLT- 1 gene promoter on gene transcription, we clone FLT- 1 gene promoter and construct luciferase reporter recombinant regulated by FLT- 1. Method:The FLT- 1 gene promoter was amplified by polymerase chain reaction and subdoned into pGL3 Basic vector to construct pGL3 Basic luciferase reporter expression vector containing FLT- 1 gene promoter(pGL3 - FLT- Basic - luc), Then the expression vector was identified by restriction enzymes digestion, PCR analysis and DNA sequencing. Result: DNA sequencing and digestion confirmed that the recombinant of plamid pGL3 - Basic- luc contained FLT- 1 promoter identical to that in GeneBank. Condusion: Luciferase re- porter vectors regulated by FLT- 1 promoter were successfully constructed, which will offer experimental foundation for gene therapy study of vascular disease.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
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  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503