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毕赤酵母中外源表达脂肪酰-CoA还原酶生产脂肪醇
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:微生物学通报
  • 时间:0
  • 页码:-
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]武汉大学药学院组合生物合成与新药发现教育部重点实验室,湖北武汉430071, [2]湖北省合成微生物技术工程实验室武汉生物技术研究院,湖北武汉430075
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA02A701); 国家自然科学基金项目(No.31222002,31170096)~~
  • 相关项目:大肠杆菌中人工合成体系构建高效脂肪酸合成途径的研究
中文摘要:

【目的】通过在毕赤酵母Komagataella pastoris GS115中外源表达来源于霍霍巴[Simmondsia chinensis(Jojoba)]的脂肪酰-Co A还原酶Jojoba FAR,利用微生物发酵生产脂肪醇。【方法】以质粒p RL105为模板PCR扩增获得霍霍巴脂肪酰-Co A还原酶的编码基因,以p GAPZαA为载体构建重组表达质粒p GAP-far,并通过电转化法转入K.pastoris GS115,筛选转化子并发酵,气相色谱-质谱联用检测发酵产物。【结果】构建了毕赤酵母重组菌株p GAPZ-far-GS115,通过摇瓶发酵检测到脂肪醇的合成。随后在7 L规模的发酵罐上发酵验证,得到脂肪醇产量为134.74 mg/L,产率为1.22 mg/(L·h)。【结论】实现了脂肪醇在毕赤酵母中的生物合成,为工业上利用毕赤酵母生产脂肪醇奠定了一定基础。

英文摘要:

[Objective] We selected Simmondsia chinensis(Jojoba) fatty acyl-Co A reductase Jojoba FAR for heterologous expression in Komagataella pastoris strain GS115 to produce fatty alcohol by fermentation. [Methods] Gene encoding this fatty acyl-Co A reductase was amplified from plasmid p RL105 and cloned into the plasmid p GAPZαA; the recombinant expression plasmid was transformed into K. pastoris GS115 by electrotransformation. We detected fatty alcohol from positive transformant by GC-MS. [Results] We constructed a recombinant K. pastoris GS115 strain p GAPZ-far-GS115 that produced fatty alcohols in flask fermentation. Afterwards, a fed-batch fermentation was used for further verification. And the engineered strain produced 134.74 mg/L fatty alcohols with a productivity of 1.22 mg/(L·h). [Conclusion] Our findings prove the possibility to produce fatty alcohol in K. pastoris GS115, provide the potential for industrial production of fatty alcohol by K. pastoris.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:29487