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半导体量子点-Smad2单克隆抗体荧光探针的制备及其相关性质检测
  • ISSN号:1000-1182
  • 期刊名称:《华西口腔医学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R782.2[医药卫生—口腔医学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科,重庆400016
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30470893)
中文摘要:

目的制备半导体量子点-Smad2单克隆抗体荧光探针(QDs-Smad2单抗荧光探针),并对其相关光学性质和特异免疫性识别能力进行检测。方法1)用半导体量子点和Smad2单克隆抗体通过化学偶联法制备水溶性的QDs-Smad2单抗荧光探针并纯化;2)用紫外分光光度计和荧光分光光度计分别测定QDs-Smad2单抗荧光探针的吸收光谱、发射光谱,在激光共聚焦显微镜下观察并检测QDs-Smad2单抗荧光探针的形态、荧光强度和光化学稳定性;3)转化生长因子-β1(TGF-β1)和大鼠牙乳头细胞共同孵育24h后,采用SP免疫细胞化学法和QDs-Smad2单抗荧光探针直接免疫荧光成像法观察比较Smad2信号蛋白分子在大鼠牙乳头细胞内的分布,并检测细胞内QDs-Smad2单抗荧光探针的相关光学性质。结果半导体量子点与Smad2单抗通过共价结合形成稳定的QDs-Smad2单抗荧光探针,QDs-Smad2单抗荧光探针对大鼠牙乳头细胞内Smad2分子具有特异性的识别能力;QDs-Smad2单抗荧光探针仍具有QDs所具有的激发光谱宽,发射光谱窄,荧光度强,光化学稳定性好等优良光学特征。结论生物修饰的半导体量子点和单克隆抗体通过共价结合形成纳米分子探针后仍具有特异免疫识别能力和量子点独特的光学性质,这为半导体量子点用于活细胞内对蛋白质分子进行实时、原位、长时间动态可视化检测提供了科学基础和依据。

英文摘要:

Objective To prepare semiconductor quantum dots(QDs)-Smad2 monoclonal antibody fluorescent probes, to detect the optical qualities and the ability to specific recognition of Smad2 in rat dental papillae cells (RDPC) of quantum dots-Smad2 monoclonal antibody fluorescent probes. Methods 1)QDs were chemically modified with Smad2 proteins to prepare water soluble QDs-Smad2 monoclonal antibody fluorescent probes which were purified after pre- paratiorr 2)The absorption band and emission band of these probes were obtained through ultraviolet spectrophotometer and fluorospectrophotometer, the .shape, fluorescence intensity and photochemistry stability of these probes were studied through confocal laser scanning fluorescence microscopy. 3)Before the location of Smad2 proteins in RDPC was studied with anti-Smad2 immunocytochemical method and direct immunofluorescence imaging, RDPC were incubated with transforming growth factor-β1 (TGF-β1), and the related optical qualities of quantum dots-Smad2 monoclonal antibody fluorescent probes in RDPC were detected. Results QDs and monoclonal antibody linked together through covalent bond to form the fluorescent probes which could specifically and effectively recognize Smad2 proteins in RDPC. These fluorescent probes still had good properties, including broad excite spectra, narrow emission spectra, high fluorescence intensity and photostability. Conclusion QDs and monoclonal antibody could link together through covalent bond to form the nanometer molecular probes with distinct optics character and photostability, which provides the scientific evidence that QDs can visualize the molecular movement in living cells in long-term, in situ and in real time.

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期刊信息
  • 《华西口腔医学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:陈谦明
  • 地址:四川省成都市人民南路三段14号华西口腔医学院教学楼8层
  • 邮编:610041
  • 邮箱:hxkqyxzz@vip.163.com
  • 电话:028-85503479
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-1182
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1169/R
  • 邮发代号:62-162
  • 获奖情况:
  • 1992年获全国优秀科技期刊二等奖,1995年获四川省十佳期刊,1997年获全国优秀科技期刊三等奖,2000获四川省年第二届优秀期刊一等奖,2003年获第二届国家期刊奖百各重点期刊奖,2005年获教育部组织的全国高校科技期刊先进集体称号,2007年获第一届四川出版期刊奖一等奖,2008年获教育部中国高校精品科技期刊奖、教育部全...,2009年获第二
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16713