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丁酸钠体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞
  • ISSN号:1000-4718
  • 期刊名称:《中国病理生理杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R363[医药卫生—病理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中山大学附属第二医院小儿外科,广东广州510120
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30471799)
中文摘要:

目的:应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞(ESC)源性肝干细胞肝内移植,观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性等情况,为ESC移植在难治性肝病治疗中的临床应用提供实验依据。方法:倒千里光碱+70%肝部分切除建立BALB/c小鼠的治疗性肝再生模型.用荧光示踪剂CFDA SE标记移植细胞,将经淤胆血清“病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞经门静脉移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内。然后荧光显微镜下观察,检测移植细胞体内分布、整合与肝细胞替代、体内生长分化等情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况。并通过观察其体内成瘤性对筛选出的ESC源性肝干细胞的安全性进行评估。结果:CFDA SE标记的ESC源性肝干细胞肝内移植1周,受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布。2周后,肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大,且可见类似肝索样结构排列。共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明,受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号(呈黄色荧光),血清白蛋白水平则无明显差异(P>0.05).6周内未见畸胎瘤形成,而将未分化的ESC移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成.结论:经淤胆血清“病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效整合入宿主肝板、在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能.其安全性较好,6周内未见畸胎瘤形成。

英文摘要:

AIM : To study the proliferation, differentiation and the capacity of forming teratomas of ESC - derived hepatic stem cells in mouse pre - treated with retrorsine and 70% partial hepatotomy. METHODS: The ESC - derived hepatic stem cells, labelled with CFDA SE, were transplanted into BALB/c mouse liver. The distribution, incorperation and proliferation of transplanted cells were observed under fluorescent microscopy. Hepatic function was assayed by detecting albumin level in serum. The situation of forming teratomas in vivo was also evaluated. RESULTS- 1 week post transplantation, some scattered region was green under fluorescent microscopy. The aera of green region increased apparently in 2 weeks, and cord -like. structure was observed. Immunofluorescent staining of albumin demonstrated some positve cells, but there was no significant difference for albumin level in serum ( P 〉 0. 05 ). No teratoma was formed in the experimental group, while a large teratoma was observed in control group in 6 weeks post - transplantation. CONCLUSION : The ESC - derived hepatic stem cells are normally incorporated into mouse liver parenchymal structure, proliferate and differentiate further in vivo and possess some hepatic functions without forming teratomas.

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期刊信息
  • 《中国病理生理杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国病理生理学会
  • 主编:陆大祥
  • 地址:广东省广州市黄埔大道西601号
  • 邮编:510632
  • 邮箱:obsbjbb@jnu.edu.cn
  • 电话:020-85220269
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4718
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1187/R
  • 邮发代号:46-98
  • 获奖情况:
  • 1997-2000年连续获得中国科协优秀基础性和高科技...,1992、1996、2000、2004、2008年,连续五次入选中...,2008-2010年,连续三年荣获“百种中国杰出学术期...,2010年获广东省期刊最高奖——品牌期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:37010