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超顺磁性氧化铁标记反义寡脱氧核苷酸探针在转染细胞磁共振成像中的应用
  • ISSN号:1000-503X
  • 期刊名称:《中国医学科学院学报》
  • 分类:R811.5[医药卫生—放射医学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院放射科,重庆400016, [2]重庆医科大学药学院生物制药教研室,重庆400016, [3]重庆市第九人民医院肿瘤科,重庆400700, [4]重庆医科大学基础医学院放射肿瘤学教研室,重庆400016
  • 相关基金:国家自然科学基金(30070230)、重庆市自然科学基金(2008BB5209)、重庆市卫生局科研基金(062025)和重庆医科大学优秀博士基金(2006-182)
中文摘要:

目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25~40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均〈0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均〈0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。

英文摘要:

Objective To prepare the superparamagnetic iron oxide (SPIO) -labeled antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) probe and evaluate the application of this probe in cellular magnetic resonance imaging (MRI). Methods We prepared the SPIO-labeled ASODN probe using chemical cross linking method to conjugate SPIO to ASODN, detected its configuration by atomic force microscopy, determined the conjugating rate and biology activation by high performance liquid chromatography, and detected the stability by polyacryl- amide gel electrophoresis. After that, we transfected the SK-Br3 oncocytes which had over-expression of the c-erbB2 oncogene by this probes, observed the intracellular iron distribution by optical microscope, measured iron content by atomic absorption spectroscopy, and observed the signal change by MRI. Results Atomic force microscope showed that the SPIO-labeled ASODN probe was mostly spherical and well-distributed, with a diameter of 25-40nm and a conjugating rate of 100%. This probe had inhere biological activity and stability. In addition, light microscopy revealed an intracellular uptake of iron oxides in the transfected SK-Br3 oncocyte, and the iron content of the group of transfected SK-Br3 oncocytes was significantly higher than those of other contrast groups (all P 〈 0.01 ). MRI shomed that transfected SK-Br3 oncocyte had the lowest signal among all other cells ( all P 〈 0.05 ). Conclusions We prepared the SPIO-labeled ASODN probe successfully. It can effectively transfect SK-Br3 oncocyte and enter SK-Br3 oncocyte, and thus reduce the signal intension in MRI.

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期刊信息
  • 《中国医学科学院学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国医学科学院 中国协和医科大学
  • 主编:曹雪涛
  • 地址:北京东单三条九号
  • 邮编:100730
  • 邮箱:actacams@263.net.cn
  • 电话:010-65105898 65237951
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-503X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2237/R
  • 邮发代号:2-365
  • 获奖情况:
  • 1992年第一届全国优秀科技期刊三等奖,1996年第二届全国优秀科技期刊二等奖,2001年中国期刊方阵双百期刊,2004年卫生部首届医药卫生优秀期刊一等奖,第三届国家期刊奖百种重点期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:19752