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紫花苜蓿光敏色素A基因片段的克隆及其RNA干扰载体的构建
  • ISSN号:1007-0435
  • 期刊名称:《草地学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学] Q782[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30771527); 教育部博士点基金项目(20060466004)资助
中文摘要:

苜蓿(Medicagosativa L.)的秋眠性是一种光周期效应。研究植物体内重要的光受体-光敏色素A(phyto-chromeA,phyA),可能揭示其调控苜蓿秋眠性的机理。为研究其与苜蓿秋眠性的关系,本研究根据RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术原理,以紫花苜蓿幼嫩叶片为材料,提取总RNA,选取基因cDNA序列同源性较低区域设计特异性引物,并引入相应的酶切位点,利用RT-PCR克隆phyA正、反向片段,经过3次亚克隆,构建了phyA的RNAi表达载体,制备了适合转染植物组织的农杆菌菌液,为获得缺失phyA植株创超了条件。

英文摘要:

Phytochrome A(phyA) is a significant light receptors in plants and may play an important role in controlling fall dormancy in alfalfa.To investigate the function of phyA regulating photoperiodic reaction in alfalfa,phyA RNAi vectors were constructed in this study.Total RNA was isolated from fresh,young leaves,and a pair of particular primers with double enzyme sites was designed to facilitate the lower homology region of phyA genes.Then,both sense and anti-sense phyA fragments were obtained by RT-PCR.The restriction enzyme sites of vector pHANNIBAL were used to construct the RNAi unit,and inserted into plant vector pART27 to construct the phyA RNAi vector.Results laid a foundation for obtaining transgenic plants with phyA gene silenced.

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期刊信息
  • 《草地学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国草原学会
  • 主编:王堃
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学动科楼152室
  • 邮编:100193
  • 邮箱:cdxb@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733894 62732799
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-0435
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3362/S
  • 邮发代号:80-135
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13756