中文摘要：

目的 研究安氏隐孢子虫（Cryptosporidium andersoni）ATP结合盒式转运（ATP-binding cassette，ABC）蛋白1基因对细胞内液和细胞外液中K^＋、Ca^2＋、Na^＋和Mg^2＋的转运作用。 方法 设计特异性引物，从安氏隐孢子虫基因组中PCR扩增CaABC1。构建真核表达质粒pEGFP-C1-CaABC1，采用脂质体转染法将重组质粒转染至小鼠肠上皮细胞（intestinal epithelial cells，IEC）中表达，设空白组（未转染质粒组）、对照组（转染空质粒pEGFP-C1组）和转染组（转染重组质粒pEGFP-C1-CaABC1组）。用溶液离子浓度检测试剂盒检测 IEC细胞内液和细胞外液中的K^＋、Ca^2＋、Na^＋和Mg^2＋的浓度。 结果 扩增出544 bp的CaABC1基因，构建了真核表达质粒载体pEGFP-C1-CaABC1。转染小鼠IEC后，空白组未观察到绿色荧光，对照组和转染组均观察到绿色荧光。在细胞内液中，空白组K^＋、Ca^2＋、Na^＋和 Mg^2＋的浓度分别为（5.51±0.51）、（1.98±0.06）、（108.33±1.33）和（0.93±0.03）mmol/L，对照组分别为（6.25±0.70）、（1.90±0.13）、（107.73±1.79）和（0.87±0.05）mmol/L，转染组分别为（14.84±0.90）、（3.40±0.14）、（127.64±1.49）和（1.72±0.20）mmol/L。在细胞外液中，空白组K^＋、Ca^2＋、Na^＋和Mg^2＋的浓度分别为（12.72±0.83）、（3.72±0.03）、（116.83±1.04）和（2.02±0.18）mmol/L，对照组分别为（10.11±0.90）、（3.58±0.06）、（115.89±1.86）和（1.71±0.41）mmol/L，转染组分别为（5.77±0.21）、（1.29±0.18）、（96.21±1.19）和（0.64±0.02）mmol/L。转染组K^＋、Ca^2＋和Mg^2＋与对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0.05）。 结论 CaABC1蛋白具有协助转运K^＋、Ca^2＋和Mg^2＋离子的作用。

英文摘要：

Objective To investigate the transportation of intracellular and extracellular K^＋, Ca^2＋, Na^＋ and Mg^2＋ under the function of Cryptosporidium andersoni ATP-binding cassette（CaABC） 1 gene. Methods CaABC1 gene was amplified by PCR using specifically designed primers. The eukaryotic expression plasmid pEGFP-C1-CaABC1 was constructed, and transfected into mouse intestinal epithelial cells via liposome transfection. The blank（with no transfection） and control groups（transfected with empty plasmid pEGFP-C1） were also set. Changes in intracellular and extracellular K^＋, Ca^2＋, Na^＋ and Mg^2＋ concentrations were examined by the ion concentration assay kit. Results PCR amplification resulted in a 544 bp product. The recombinant plasmid pEGFP-C1-CaABC1 was successfully constructed. Green fluorescence was seen in the control and transfected groups, but not in the blank group. The concentrations of K^＋, Ca^2＋, Na^＋ and Mg^2＋ in intracellular fluid were （5.51 ± 0.51）, （1.98 ± 0.06）, （108.33 ± 1.33） and （0.93 ± 0.03） mmol/L in the blank group; （6.25 ± 0.70）, （1.90 ± 0.13）, （107.73 ± 1.79） and （0.87 ± 0.05） mmol/L in the control group; and （14.84 ± 0.90）, （3.40 ± 0.14）, （127.64 ± 1.49） and （1.72 ± 0.20） mmol/L in the transfected group. The concentrations of K^＋, Ca^2＋, Na^＋ and Mg^2＋ in extracellular fluid were （12.72 ± 0.83）, （3.72 ± 0.03）, （116.83 ± 1.04） and （2.02 ± 0.18） mmol/L in the blank group; （10.11 ± 0.90）, （3.58 ± 0.06）, （115.89 ± 1.86） and （1.71 ± 0.41） mmol/L in the control group; and （5.77 ± 0.21）, （1.29 ± 0.18）, （96.21 ± 1.19） and （0.64 ± 0.02） mmol/L in the transfected group. There were significant differences in K^＋, Ca^2＋ and Mg^2＋ concentrations between the transfected group and the control group. Conclusion CaABC1 participates in the transportation of K^＋, Ca^2＋ and Mg^2＋.