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piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院功能基因组实验室,成都610064
  • 相关基金:国家自然科学基金重大研究计划(90919005);教育部博士点基金(20090181120076)
中文摘要:

piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PBll56、atula—pBac—K10.ITR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmCherry—N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一个转座插入位点在HEK293基因组DNA上的位置.

英文摘要:

The PB inverted terminal repeats (ITR) and PB transposase (PBase) were cloned from the plasmid PBl156 and atub-pBac-K10. The PB binary cotransfection system consisted of a donor and a helper plasmid. The donor plasmid contained the two ITRs in which PBase was replaced by a red fluorescent protein (RFP) marker. The helper plasmid carried the PBase fragment but lacked the ITRs. The result of cotransfection the donor and helper in HEK293 cells indicated that the PB binary cotransfection system is an efficient transposition system. And inverse PCR (IPCR) was performed to recover sequence adjacent to the PB ITR.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542