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甘蔗SPSⅢ内含子地高辛探针的制备及检测
  • 期刊名称:福建师范大学学报(自然科学版)
  • 时间:0
  • 页码:104-108
  • 语言:中文
  • 分类:Q946[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]福建师范大学生命科学学院,福建福州350108, [2]农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福建福州350108
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30871575); 国家高技术研究发展计划“863”项目(SQ2007AA10XK140067); 福建省自然科学基金资助项目(2009J05059)
  • 相关项目:甘蔗蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因克隆及其调控表达机制的研究
中文摘要:

以甘蔗SPS基因选择性剪接保留的内含子6,7,8片段为靶序列,利用PCR扩增技术分别制备出3种地高辛标记的SPS内含子探针:SPS-intron 6探针167 bp,SPS-intron 7探针93 bp和SPS-intron8探针175 bp,并通过斑点杂交实验表明这3种探针灵敏度高,都能检测到pg级的靶核酸,且特异性好,阴性对照实验显示无杂交信号.

英文摘要:

With sugarcane SPS Ⅲ gene alternative splicingintron retention 6,7,8 fragments as the three target sequences,PCR amplification technique prepared three SPSⅢ intron probes labelled with Digoxgenin:SPS-intron 6 probe 167 bp,SPS-intron 7 probe 93 bp and SPS-intron 8 probe 175 bp.Dot-blot hybridization indicated the sensitivity of the probes was high,detecting the pg level of the target nucleic acid,and the specificity was good,for the negative control showed non-hybrid signal.

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