中文摘要：

目的构建与鉴定靶向大鼠海马干细胞（neural stem ceils，NSCs）信号转导与转录激活因子3（signaltransducer and activator of transcription factor3，STAT3）shRNA慢病毒载体。方法：设计并合成4条靶向大鼠STAT3基因的shRNA干扰序列（shRNAl、2、3、4）及1条阴性对照序列（negative control，NC），将其分别重组于慢病毒载体，慢病毒包装后感染大鼠海马神经干细胞，荧光显微镜下通过观察绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）表达计算慢病毒感染效率；利用RT-PCR和Western Blot检测干扰后大鼠海马NSCs中STAT3的mRNA和蛋白质表达水平。结果：干扰序列测序结果正确；感染指数（muhiply ofindex，MOI）为1：20时感染效率最高为85．6±3．14％；感染大鼠海马NSCs 72 h后利用RT．PCR和Western Blot检测干扰效率发现shRNAl干扰效率最好，其基因水平干扰效率为81．3％±4．22％；蛋白水平干扰效率为72．3％±5．12％。结论：成功构建靶向大鼠海马干细胞STAT3慢病毒干扰载体，并通过筛选发现shRNAl能有效抑制NSCs的STAT3 mRNA和蛋白表达，为研究海马NSCs分化机制奠定了工作基础。