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利用谱图校正提高色谱-质谱联用的分析效率
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:《色谱》
  • 时间:0
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]复旦大学化学系,上海200433, [2]复旦大学上海医学院生物医学研究院,上海200032
  • 相关基金:基金项目:国家重大科学计划项目(2010CB912700,2013CB911201,2011CB910600);国家高技术研究发展计划项目(2012AA020203.2014AAQ00361);国家自然科学基金重点项目(21227805).
中文摘要:

在使用对二甲基亚砜( DMSO)和 NEDD8激活酶抑制剂( MLN4924,MLN)刺激的人脐静脉内皮细胞( HU-VEC)内的蛋白质进行分析的过程中,利用 Progenesis LC-MS 软件对色谱图进行了保留时间的校正,并比较了同组分多次重复实验中的谱图相似率及两种刺激下细胞内蛋白质色谱图的相似度。样品经双酶切处理后,加入 Qcon-CAT 标准蛋白质混合物作为参照,经高效液相色谱-串级质谱分离,后续又对谱图进行了校正与分析。经过谱图校正,将蛋白质鉴定结果从7000个左右提高到8000个以上,提高了蛋白质的鉴定效率。在利用谱图计数进行相对定量时,还分析了 DMSO 和 MLN 分别刺激 HUVEC 后细胞内的蛋白质差异在1000个左右,并给出了校正后的色谱总离子流图的相似度比较。相比其他方法更为简单快捷和流程化,具有高通量高灵敏度的优点。

英文摘要:

In the analysis of proteins in human umbilical vein endothelial cells( HUVEC)trea-ted with dimethyl sulfoxide ( DMSO ) and NEDD8-activating enzyme inhibitor ( MLN4924, MLN),the Progenesis LC-MS software( Nonlinear Dynamics Ltd)was applied to liquid chro-matography spectrum alignment,while spectrum similarities were figured out among several experiments of the same sample,and also among different samples. After double enzymolysis, the sample was added with digested QconCAT standard proteins. They were separated by HPLC-MS / MS,followed by spectrum alignment and data analysis. This established experiment flow offered a better identification result of more than 8 000 proteins,while the original result was about 7 000 proteins,ensuring a relatively high identification efficiency. On the basis of rel-ative quantification with spectrum count,the described procedure can analyze the differential expression of proteins induced by DMSO and MLN. The similarities of total ion chromatograms after alignment were also compared. This method was proved to be quick and easy,with the advantages of high throughput and high sensitivity.

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期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730