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血液总DNA提取方法的优化
  • ISSN号:1007-7383
  • 期刊名称:《石河子大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]石河子大学医学院,新疆石河子832002, [2]石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(81560338); 新疆生产建设兵团国际科技合作项目(2016AH001); 石河子大学大学生研究训练计划项目(SRP2017062)
中文摘要:

目的:比较不同蛋白酶K浓度对血液总DNA浓度和纯度提取的影响作用。方法:随机抽取22份新疆建设兵团第三师51团全民体检血液样本,以TIANGEN生化科技(北京)有限公司血液提取试剂盒(离心柱型)为基础,分析11种不同蛋白酶K浓度(18.0,18.4,18.6,18.8,18.9,19.0,19.1,19.2,19.4,19.6,20.0mg/m L)对250μL血液总DNA浓度和纯度提取的影响。结果:(1)在蛋白酶K浓度在18.0-20.0mg/m L范围时,随着蛋白酶K浓度的增加,所提取的DNA浓度在19.0mg/m L时达到最大,当继续增加蛋白酶K浓度时,DNA浓度呈明显下降趋势;(2)随着蛋白酶K浓度的增加,OD_(260)/OD280在18.6mg/m L时达到最大,且继续增加蛋白酶K浓度,OD260/OD280呈缓慢下降趋势;(3)蛋白酶K浓度在18.8-19.0mg/m L时,所提取的DNA浓度和纯度最佳。结论:建议TIANGEN生化科技(北京)有限公司在提取250μL人血液样本时选择蛋白酶K浓度应为18.8-19.0mg/m L,既能提高血液核酸DNA的提取质量,又可降低提取人血液DNA的成本。

英文摘要:

Objective: Effect on concentration and purity of blood total DNA with different proteinase K concentration. Methods:A total of 22 blood samples randomly choosed from the 51 st TUAN division Hospital,First Affiliated Hospital of School of Medicine, Shihezi University. All the samples were extracted with Mammal blood genome DNA extraction kit(centrifugal column type), produced by TIANGEN biochemical technology(Beijing,China).Eleven different coconcenrtations of proteinase K were used to analyze their effect on concentration and purity of blood total DNA,including 18.0,18.4,18.6,18.8,18.9,19.0,19.1,19.2,19.4,19.6 and 20.0mg/m L.R esults:(1)the concentration of DNA reached peak when the concentration of proteinase K was 19.0mg/m L in the range of 18.0-19.0mg/m L for proteinase K,and decreased with increasing proteinase K concentration in the range of 19.0-20.0mg/m L for proteinase K:(2)DNA purity detected with OD260/OD280 reached the maximum when the concentration of proteinase K was 18.6mg/m L,and decreased slowly with increasing the concentration of proteinase K;(3)concentration and purity of blood total DNA were optimal when the concentration of proteinase K at18.8-19.0mg/m L.Conclusion:Our findings conveyed us that concentration of proteinase K is 18.8-19.0mg/m L when extracting 250μL human blood samples based on Mammal blood genome DNA extraction kit(TIANGEN biochemical technology), which can improve the extraction quality of blood genome DNA,but also can reduce the cost of DNA extraction.

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期刊信息
  • 《石河子大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:石河子大学
  • 主编:向本春
  • 地址:新疆石河子市北四路
  • 邮编:832003
  • 邮箱:xuebaozrb@shzu.edu.cn
  • 电话:0993-2058977
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7383
  • 国内统一刊号:ISSN:65-1174/N
  • 邮发代号:58-174
  • 获奖情况:
  • 2006、2008、2010、1012年荣获“首届中国高校特色...,在新疆第三次优秀科技期刊评比中荣获新疆科技期刊...,在第四、五、六、七次获综合效益奖及二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:8226