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稳定表达siRNA-ARK5基因的胃癌SGC-7901细胞系的构建
  • ISSN号:1006-5571
  • 期刊名称:青岛医药卫生
  • 时间:2013.10.10
  • 页码:321-323+329
  • 分类:R730.2[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]潍坊市第二人民医院消化内科,山东潍坊261042, [2]潍坊医学院药理学实验室, [3]潍坊医学院病理学教研室
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81072068)、山东省自然科学基金(ZR2011HL047)及潍坊市科学技术发展计划项目(201201230)
  • 相关项目:ARK5在胶质瘤侵袭中的分子机制研究
中文摘要:

目的 构建稳定表达siRNA-ARK5基因的人胃癌SGC-7901细胞系,为研究ARK5在胃癌发生发展中的作用与机制奠定基础.方法 把pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-ARK5重组质粒通过脂质体转染胃癌SGC-7901细胞,利用不同浓度的G418筛选获得稳定转染细胞株,挑取单克隆细胞系进行培养,应用荧光显微镜和RT-PCR技术确定是否获得了ARK5基因被稳定抑制的单克隆细胞系.结果 成功挑取的4株单克隆细胞中2株细胞的ARK5基因的表达被显著抑制.结论 通过siRNA干扰技术成功构建了稳定表达siRNA-ARK5基因的胃癌SGC-7901细胞系,为研究ARK5在胃癌发生发展中的作用与机制奠定了基础.

英文摘要:

Objective To establish gastric cancer SGC-7901 cell lines that stably express siRNA-ARK5 for the study of the mechanism of ARK5 on the occurrence and development of gastric cancer. Methods The pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-ARK5 plasmids were transfected into gastric cancer SGC-7901 cells with lipofectamine. G418 was used to selected out stable transfection clone cells, the efficiency of transfection and ARK5 gene silencing were evaluated by RT- PCR and fluorescence microscopy. Results ARK5 gene expression was significantly inhibited in 2 of 4 selected stable clones. Conclusion We successfully established gastric cancer SGC-7901 cell line with stable siRNA-ARK5 gene expression. This cell line can provide a cell model for investigating the relationship between ARK5 and the gastric cancer malignancy.

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期刊信息
  • 《青岛医药卫生》
  • 主管单位:山东省卫生厅青岛市卫生局
  • 主办单位:青岛市医学会
  • 主编:周培键
  • 地址:青岛市市南区龙山路1号甲
  • 邮编:266003
  • 邮箱:qingdaoyiyao@qq.com
  • 电话:0532-82798837
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-5571
  • 国内统一刊号:ISSN:37-1249/R
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