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棉花锌指蛋白GhZFP1相互作用蛋白的酵母双杂交筛选
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:《中国生物化学与分子生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]山东中医药大学基础医学院,济南250355, [2]山东农业大学作物生物学国家重点实验室,泰安271018
  • 相关基金:国家自然科学基金资助(No.30970230); 中国博士后科学基金面上项目(No.20090451343); 山东省博士后创新项目专项基金(No.200803033)
中文摘要:

GhZFP1蛋白是从盐胁迫棉花幼苗cDNA文库中分离的一种CCCH型锌指蛋白.初步的生物学功能研究表明,过量表达该基因的转基因烟草耐盐性和抗病性显著提高.为深入研究GhZFP1蛋白的作用机制,构建pGBKT7-m1诱饵表达载体,利用酵母双杂交系统从盐胁迫诱导棉花cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.通过阳性克隆的表型确定、PCR和限制性内切酶检测以及测序和生物信息学分析,获得9个与诱饵蛋白相互作用的靶蛋白.双分子荧光互补实验证明,GhZFP1与GZIRD19A确实存在互作关系.通过分析这些靶蛋白的已知功能,为研究GhZFP1锌指蛋白的未知生物学功能提供重要信息.

英文摘要:

We isolated a novel CCCH-type zinc finger protein GhZFP1 (Gossypium hirsutum zinc finger protein 1) from a salt-induced cotton (Gossypium. hirsutum) cDNA library. It has been demonstrated that overexpression of GhZFP1 in transgenic tobacco enhanced tolerance to salt stress and resistance to disease. To get new clues and probe the unknown function and mechanism of GhZFP1,we isolated and identified proteins that interact with GhZFP1 by yeast two-hybrid system. The bait plasmids ( pGBKT7-GhZFP1,pGBKT7-m1,pGBKT7-m2 ) were constructed,respectively. By using the N-terminal 237 amino acids of GhZFP1 (m1) as a bait,we screened the salt-induced cotton leaves cDNA library. The positive clones were sequenced and further analyzed by bioinformatic approach. Nine positive clones interacting with GhZFP1 were identified. The interaction between GhZFP1 and GZIRD19A ( GhZFP1 interacting and responsive to dehydration protein 19A) was further confirmed by bimolecular fluorescence complementation ( BiFC ) visualization assay. Given the significant functional correlation between GhZFP1 and its interacting proteins,it will help to elucidate the possible mechanisms of GhZFP1 in improving the tolerance of transgenic plants.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731