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利用机油提高琼脂糖凝胶中DNA片段的回收率
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q812[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]中山大学基因工程教育部重点实验室与生物工程研究中心,广东广州510275
  • 相关基金:广东省科技计划项目(“新型固氮酶基因的转基因植物研究 ”2008B020100001); 广东温氏食品集团科研项目(“应对快速变异的禽流感病毒的混合多肽疫苗的研制 ”wens-kjhz-2007-03-09-01)资助
中文摘要:

目的:发展一种简单快速经济的回收琼脂糖凝胶中DNA的方法。方法:将切的琼脂糖凝胶胶块放入嵌套Eppendorf管中捣碎,加入50μL机油,室温下12 000r/min离心5min,取大Eppendorf管中收集的液体跑胶检验,凝胶上包括代表100bp~2000bp不同大小DNA分子回收率的分子量标准DL2000。结果:DNA回收率可由加机油前的约35%提高为加机油后的45%-90%,回收效率的波动主要取决于DNA片段的大小、切下的含有DNA的胶块的大小及操作者的熟练程度。结论:该方法快速、简便、经济,具有良好的重复性与特异性,比许多国产的试剂盒更可靠。

英文摘要:

Objective:To develop a simple,easy and inexpensive method for the rapid DNA recovery from agarose gel slice by using motor oil.Method: A 0.5ml Eppendorf tube was punctured in the bottom with a syringe needle for the opening of a hole.Then it was loosely packed with cotton wool,which was subsequently placed inside a capless 1.5 ml Eppendorf tube.Pieces of the gel slice were placed inside the small tube and mashed with pipet tips.Then it was added with motor oil,and subjected to a 5min centrifugation at 12000r/min at room temperature.Flowthrough was visualized on agarose gel.Result: DNA recovery rate could reach 45%-90%,showing a marked improvement over our previous method.Conclusion: This method is simple,rapid,economical,efficient,and more reliable than domestic DNA recovery kits.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503