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Expression of a New hemA Gene from Agrobacterium radiobacter in Escherichia coli for 5-Aminolevulinate Production
  • ISSN号:1004-9541
  • 期刊名称:《中国化学工程学报:英文版》
  • 时间:0
  • 分类:Q55[生物学—生物化学] Q781[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]Institute of Bioengineering, College of Materials Science and Chemical Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China
  • 相关基金:Supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 20306026).
中文摘要:

编码 synthase 是的 5-aminolevulinate (翼) 的新缝 A 基因克隆的 fromAgrobacterium radiobacter zju-0121.The 翼 synthase 催化 succinyl 辅酶 A (succinyl-CoA ) 和甘氨酸的 pyridoxal phosphate-dependentcondensation 生产带 A.radiobacter 缝的 ALA.Four 原生质标志基因被转变成不同 E.coli 种类。翼 synthase 和翼生产 werestudied.The 结果的表示上的基因、生理的因素的效果显示翼 synthase 和在不同表示系统的翼的生产的最后的细胞内部的活动大部分变化了。在他们之中,怀有表示原生质标志 pET28-A.R-hemA 的重新组合 E.coliBL21 (DE3 ) 是最合适的。效果 ofisopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG ) 增加时间, IPTG 集中,文化温度和翼生产上的先锋和葡萄糖的起始浓度是表示的 alsoevaluated.The 翼 synthase 说明了因为翼 synthase 的大约 23.7% 细胞内部的 solubleprotein.The 高比放射性是 13.8nmol-min ~(-1)centre dotmg~(-1)ofintracellular 可溶的蛋白质。在重新组合 E.coli 的批文化,细胞外的 ALAconcentration 到达了 0.9g 中心点 L~(-1) 。

英文摘要:

A new hemA gene encoding 5-aminolevulinate (ALA) synthase was cloned from Agrobacterium radiobacter zju-0121. The ALA synthase catalyzes the pyridoxal phosphate-dependent condensation of succinyl coenzyme A (succinyl-CoA) and glycine to produce ALA. Four plasmids carrying the A. radiobacter hemA gene were transformed into different E. coli strains. The effects of both genetic and physiological factors on the expression of ALA synthase and ALA production were studied. The results indicated that the final intracellular activity of ALA synthase and the production of ALA in different expression systems varied largely. Among them, the recombinant E. coli BL21 (DE3) harboring the expression plasmid pET28-A. R-hemA was the most suitable one. The effects of isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside (IPTG) addition time, IPTG concentration, culture temperature and the initial concentration of precursors and glucose on the ALA production were also evaluated. The expressed ALA synthase accounted for about 23.7% of the intracellular soluble protein. The highest specific activity of ALA syn- thase was 13.8 nmol.min^-1.mg^-1 of intracellular soluble protein. In the batch culture of the recombinant E. coli, the extracellular ALA concentration reached 0.9g.L^-1.

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期刊信息
  • 《中国化学工程学报:英文版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国化学工业与化学工程学会
  • 主编:
  • 地址:北京东城区青年湖路13号
  • 邮编:100011
  • 邮箱:cjche@cip.com.cn
  • 电话:010-64519487/88
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-9541
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3270/TQ
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 1998年化工系统优秀信息成果一等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),英国高分子图书馆,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊
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