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人肝中硒蛋白K相互作用蛋白的筛选与验证
  • ISSN号:0251-0790
  • 期刊名称:高等学校化学学报
  • 时间:2012.2.2
  • 页码:313-320
  • 分类:O629.7[理学—有机化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]深圳大学生命科学学院,深圳518060, [2]中国科学院长春应用化学研究所,长春130022, [3]上海复旦大学生命科学学院,上海200433
  • 相关基金:国家自然科学基金(批准号:31070731,30901182); 广东省自然科学基金(批准号:10151806001000023)资助
  • 相关项目:硒蛋白-蛋白相互作用及其与阿尔茨海默症的关系
中文摘要:

以硒蛋白K(SelK)突变体为"诱饵",采用酵母双杂交系统对人肝cDNA文库进行筛选,得到一个与SelK相互作用的蛋白──环腺苷酸应答元件结合蛋白3(CREB3).将SelK与CREB3共同转染酵母细胞,验证了SelK与CREB3的相互作用;并采用受体漂白、敏化发射和荧光寿命3种荧光共振能量转移方法进一步验证了二者间的相互作用,发现其不受SelK中硒代半胱氨酸(Sec)的影响.推测SelK可能通过其Sec之前的区域与CREB3发生作用,参与CREB3介导的内质网相关降解过程,影响相关癌症的转移和发展.

英文摘要:

Selenium,an essential trace element for human health,plays important roles in maintaining redox balance in vivo.Selenium deficiency is associated with many diseases,such as cancer,neurodegenerative diseases and cardiovascular diseases.The biological function of selenium in vivo is mainly exerted through selenoproteins.Selenoprotein K(SelK) is a newly discovered selenoprotein with unknown biological function and molecular mechanism.In this work,human SelK gene was cloned,site-directedly mutated and inserted into the "bait" plasmid to screen the human liver cDNA library using the yeast two-hybrid system.An interactive protein,homo sapiens cAMP responsive element binding protein 3(CREB3),was screened out and analyzed.SelK′ and CREB3 genes were then co-transformed into yeast cells to verify the protein interaction,followed by the co-transfection into HEK293T cells to further verify the interaction via three methods of fluorescence resonance energy transfer technique,including the receptor photobleaching,sensitized emission and fluorescence lifetime.The results show that SelK interacte with CREB3 independent of its selenocysteine residue.By interacting with CREB3,SelK may participate in CREB3-mediated endoplasmic reticulum-asso-ciated degradation and make impact on cancer migration and development.

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期刊信息
  • 《高等学校化学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学 南开大学
  • 主编:周其凤
  • 地址:吉林大学南胡校区
  • 邮编:130012
  • 邮箱:cjcu@jlu.edu.cn
  • 电话:0431-88499216
  • 国际标准刊号:ISSN:0251-0790
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1131/O6
  • 邮发代号:12-40
  • 获奖情况:
  • 首届及第二届国家期刊奖,连续两届“百种中国杰出学术期刊”,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:50676