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假单胞菌TS1138 L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆与表达
  • ISSN号:0465-7942
  • 期刊名称:《南开大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q785[生物学—分子生物学] Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南开大学生命科学学院,天津300071, [2]沈阳药科大学制药工程学院,辽宁沈阳110016
  • 相关基金:国家自然科学基金(30470053);天津市重点基金(05YFJZJC00900)
中文摘要:

提取假单胞菌TS1138染色体基因,以自行设计的引物通过PCR方法扩增得到L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cds),将其克隆至克隆载体pBluescript SKⅡ,并转化人大肠杆菌DH5α,测定了含有脱巯基酶基因(cds)的1.2kb DNA片段的序列;同时,将其克隆至表达载体pETH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS—PAGE方法对表达产物进行分析,重组蛋白量占菌体总蛋白的36.8%,经Ni—NTA柱亲合层析后,重组蛋白纯化率达88%以上.用非变性PAGE方法对基因表达的脱巯基酶进行了鉴定.

英文摘要:

The chromosomal gene of Pseudomona sp. TS1138 extracted and the L-Cysteine desulfhydrase gene (cds) was amplified by PCR with artificial primer. The amplified gene was recombined in cloning vector pBluescript SK Ⅱ and transformed into E. coll. DH5α. The 1.2 kb DNA fragment containing cds was detected. The cds was cloned into expression vector pETH, then transformed into E. coli BL21 (DE3) and afterward expressed by IPTG inducement. By SDS-PAGE analysisj, the expression protein amounted to 36.8 % of the total bacterial protein and the purification rate was above 88% after purified by Ni-NTA His-Bind Resin. The expression protein was identified by native-PAGE.

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期刊信息
  • 《南开大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南开大学
  • 主编:田建国
  • 地址:天津南开区卫津路94号
  • 邮编:300071
  • 邮箱:
  • 电话:022-23501681
  • 国际标准刊号:ISSN:0465-7942
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1105/N
  • 邮发代号:6-174
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),德国数学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4822