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PAPST1 siRNA抑制髓母细胞瘤细胞系DAOY增殖活性的研究
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:《第三军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R394.3[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学] R730.23[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学新桥医院神经外科,重庆400037, [2]兰州大学第一医院神经外科,兰州730000, [3]香港中文大学解剖与细胞病理学系,香港999077, [4]中南大学湘雅医院神经外科,长沙410008
  • 相关基金:国家自然基金面上项目(30973075);世界卫生组织国际癌症研究所博士后回国基金(FEL/10/01);第三军医大学回国人员启动基金(2011D275)
中文摘要:

目的 研究3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸转运体1(adenosine-3-phospho-5-phosphosulfate transporter 1,PAPST1)在髓母细胞瘤中的表达情况,探讨其对髓母细胞瘤细胞系增殖活性的影响。 方法 采用qRT-PCR法检测25例髓母细胞瘤标本、1例原代培养髓母细胞瘤细胞、3例髓母细胞瘤细胞系PAPST1表达,并与正常小脑组织比较,利用免疫组织化学检测PAPST1在髓母细胞瘤中的表达分布,采用PAPST1 siRNA 处理髓母细胞瘤细胞系DAOY,利用qRT-PCR、Western blot法检测PAPST1表达变化,CCK-8法检测处理后的DAOY细胞系增殖活性。 结果 与正常小脑组织相比,PAPST1在18/25 (72%)的髓母细胞瘤标本及DAOY、ONS-76细胞系中呈2倍以上的高表达,免疫组化显示PAPST1定位于细胞质中,且染色明显强于正常小脑组织,PAPST1 siRNA在mRNA及蛋白的水平明显干扰了PAPST1的表达(P〈0.05),DAOY细胞的增殖活性受到明显抑制(P〈0.05)。 结论 PAPST1在髓母细胞瘤中有广泛的高表达,下调PAPST1的表达可以降低髓母细胞瘤细胞的增殖活性。

英文摘要:

Objective To investigate the expression pattern of adenosine-3-phospho-5-phosphosulfate transporter 1 (PAPST1) in medulloblastoma (MB), and its role in proliferation of MB cells. Methods The expression of PAPST1 was examined by qRT-PCR in 25 MB tumor samples, 1 primary cultured MB cells (pri-MB), 3 MB cell lines (DAOY, D341 and ONS-76) and the normal cerebellums. The distribution of PAPST1 protein was stained by immunohistochemical technique. siRNA technique was applied in DAOY cells to knockdown the expression PAPST1 at mRNA and protein levels, which was confirmed by qRT-PCR and Western blot analysis. CCK-8 assay was carried out to determine the proliferation activity of DAOY cells after PAPST1 knockdown. Results qRT-PCR revealed 〉2 folds up-regulation in 18/25 (72%) MB samples and in DAOY and ONS-76 MB cell lines, compared with normal human cerebellum. Immunohistochemical staining revealed that the PAPST1 protein was located in the cytoplasm, and the stronger expression of PAPST1 in MB tumor tissues. The results of qRT-PCR and Western blotting showed a significant knockdown of PAPST1 at mRNA and protein levels in DAOY MB cells, and the CCK-8 assay revealed that cell proliferation was inhibited by siRNA technique. Conclusion High expression of PAPST1 is a common event in MB, and down-regulation of PAPST1 can induce proliferation inhibition in MB cells.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
  • 地址:重庆市沙坪坝区高滩岩30号第三军医大学学报编辑部
  • 邮编:400038
  • 邮箱:aammt@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023- 68752187
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1126/R
  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:47530