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水稻白叶枯病菌TonB-Dep-Rec蛋白家族成员Tdrxoo的功能鉴定
  • ISSN号:0001-6209
  • 期刊名称:《微生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q933[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
  • 相关基金:基金项目:国家自然科学基金(30671353);中央财政国家重点实验室自主研究课题专项(SKL2007SR06)
中文摘要:

【目的】旨在揭示水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)致病性和运动性及其基因表达的调控途径。【方法】本研究通过基因克隆、序列分析和缺失突变方法,对与应答调节子GacAxoo互作的Tdrxoo的分子特征和功能进行了鉴定。【结果】利用序列特异性引物进行基因扩增,成功地从野生型菌株PX099“中克隆了tdrxoo基因。Tdrxoo与其它病原黄单胞菌的同源序列高度保守,具有TonB—Dependent.Receptor(TDR)结构域,推测其是位于细菌外膜、可能接收来自细菌体外环境信号的蛋白。用基因标记交换法,构建了atdrxoo基因缺失突变体。与PX099^A相比,Atdrxoo在人工培养条件下的生长受到影响,致病性完全丧失,胞外纤维素酶和木聚糖酶活性和运动能力显著减弱,基因互补可以使之恢复;Atdrxoo嗜铁素产生无明显改变。【结论】Tdrxoo作为一种细胞外膜蛋白,可能参与调控了病菌的生长、致病性、胞外酶活性和运动性等表型。

英文摘要:

[ Objective] To demonstrate the novel regulatory pathways mediated in bacterial pathogenicity and motility in Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) , the casual agent of bacterial blight in rice. [ Methods] Molecular identification and functional characterization of Tdrxoo, which interacts with GacAxoo of the two-component regulatory system (GacSxoo/GacAxoo) in Xoo, were performed through gene cloning, sequencing and disrupt analysis. [ Results J tdrxoo was successfully cloned from the genomic DNA of wild-type PXO99A by using polymerase chain reactions with the degenerated primers tdrxooF/R. The tdrxoo gene was found to be highly conserved in the plant-pathogenic Xanthomonas spp. Sequence analysis showed that Tdrxoo was homological to a protein with the TonB-Dependent-Receptor (TDR) domain. Tdrxoo is probably localized in the outer membrane of bacterial ceils, recognizing the signals from extracellular environment, and inducing the intracellular signal transduction. A tdrxoo, the disrupted mutant, was obtained after a single cross-over recombination event between tdrxoo and the plasmid pK-tdr with the tdrxoo segment. The mutant lost the ability of causing the disease, and was affected in growth in vitro compared to PXO99A. In addition, the motility and the extracellular enzymes production of A tdrxoo were reduced, which can be restored through eomplementation of the △ tdrxoo mutant by introduction of tdrxoo, tdrxoo deficiency didn' t affect siderophore production. [ Conclusion] According to the existence of tdrxoo in Xoo genome and phenotype of △ tdrxoo, Tdrxoo, as the outer membrance protein, is proposed to be involved in regulation of pathogenicity, extracellular enzyme production, the growth and motility of Xoo.

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期刊信息
  • 《微生物学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国微生物学会 中国科学院微生物研究所
  • 主编:谭华荣
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路3号中国科学院微生物研究所B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:actamicro@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807516
  • 国际标准刊号:ISSN:0001-6209
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1995/Q
  • 邮发代号:2-504
  • 获奖情况:
  • 国家优秀期刊二等奖,中科院优秀期刊二等奖,中国科协首届优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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