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恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5F1段的克隆、表达及初步鉴定
  • ISSN号:1002-2694
  • 期刊名称:《中国人兽共患病学报》
  • 分类:R382.3[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]南方医科大学生物技术学院,广州510515
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划973专项(No.2007CB513101); 国家自然科学基金(No.30200238)联合资助
中文摘要:

目的克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F1片段,并评价其抗原性。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pET28a(+)中,构建PfRh5F1/pET28a原核表达载体。IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用WesternBlot检测其抗原性。结果成功构建了PfRh5F1/pET28a原核表达系统,并在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,表达产物能被恶性疟原虫感染患者血清识别,而不能被间日疟原虫感染患者及正常人血清识别。结论恶性疟原虫PfRh5F1段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。

英文摘要:

In order to clone and express reticulocyte-binding protein homologue 5(PfRh5)F1 fragment gene of Plasmodium falciparum,the 429bp PfRh5 gene(91-519)was specifically amplified by polymerase chain reaction and cloned into pET28a(+)vector.The recombinant plasmid was then transformed and induced to express in E.coli Rosetta.The expressed product was analyzed by SDS-PAGE and Western Blot respectively.And the expressed protein was insoluble with a size of about 21.9 kDa as predicted.Also,it exhibited a specific reaction with immune sera obtained from patients with Pf maleria.These results demonstrate that the PfRh5 F1 fragment has been successfully expressed and the expressed protein has certain antigenicity.

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期刊信息
  • 《中国人兽共患病学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国微生物学会
  • 主编:严延生
  • 地址:福州市津泰路76号
  • 邮编:350001
  • 邮箱:rsghb@fjcdc.com.cn
  • 电话:0591-87552018
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-2694
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1284/R
  • 邮发代号:34-46
  • 获奖情况:
  • 中国基础医学核心期刊,中国生物医学核心期刊,中国科学引文数据库列为来源期刊及统计源,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9000