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透明软骨材料经脱细胞处理后细胞外基质成分变化的比较
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:第三军医大学学报
  • 时间:2013.10.10
  • 页码:2028-2032
  • 分类:R322.72[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学] R329-33[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学西南医院关节外科,重庆400038, [2]解放军昆明总医院全军骨科研究所,昆明650032
  • 相关基金:国家自然科学基金(81071484);重庆市回国人员启动基金(CSTC2011BB5042);解放军昆明总医院院管课题(201303013)
  • 相关项目:脱细胞基质构建含COJ结构骨软骨支架成软骨效应分析
作者: 段小军|
中文摘要:

目的比较Triton X-100和十二烷基硫酸钠(SDS)试剂对人关节软骨脱细胞处理后细胞外基质成分的变化,指导筛选适宜的制备。方法首先制备人关节软骨微粒,再采用两种不同试剂分别作用于软骨细胞微粒,清洗和消化步骤相同,脱细胞完成后分别进行DNA、总氨基酸及总胶原和葡萄糖胺聚糖(GAG)含量检测,分为Triton X-100组和SDS组,并与对照组(正常软骨组织)进行基质成分的比较分析。结果Triton X-100组、SDS组和对照组经脱细胞处理后其GAG含量分别为(84.71±3.72)、(122.63±6.05)、(232.78±75.33)μg/mg,羟脯氨酸含量分别为(24.92±1.74)、(24.23±1.68)、(24.54±2.99)μg/mg,DNA含量分别为(0.242±0.065)、(0.225±0.057)、(5.679±1.873)μg/mg。结论Triton X-100和SDS两种试剂均能将软骨微粒中软骨细胞成分有效去除,胶原成分保留量在两组中无明显差异;但是应用SDS行脱细胞处理后能保留更多的GAG成分,更有利于维持软骨细胞功能,是较好的材料制备技术。

英文摘要:

Objective To compare the changes of extracellular matrix in decellularized articular carti- lage treated by Triton X-100 and sodium dodecyl sulfate(SDS) to optimize the suitable preparation. Methods First, cartilage panicles were prepared, then the two reagents was used to treat the ceils of cartilage particles respectively, with the same experimental procedures of rinsing and digestion. After decellularization, the contents of DNA, amino acid, collagen and glycosaminoglycan (GAG) were measured, and the results were compared with those of the normal cartilaginous tissue. Results After decellularization, the GAG contents were 84.71 ±3.72 and 122.63 ± 6.05 μg/mg respectively in the extracellular matrix of articular cartilages treated by Triton X-100 and SDS, while that was 232.78 + 75.33 μg/mg in the extraeellular matrix of normal cartilaginous cells. Hydroxyproline content was 24.92 ± 1.74 and 24.23 + 1.68 μg/mg respectively after the decellularization, and that in the normal matrix was 24.54 + 2.99 μg/mg. DNA content was 0. 242 + 0.065 and 0. 225 ± 0. 057 μg/mg respectively, and that in the normal one was 5. 679 ± 1. 873 μg/mg. Conclusion Cell components are removed effectively from cartilage particles by both Triton X-100 and SDS without obvious difference of collagen remains. While SDS reserves more GAG components and is more helpful to maintain the cartilage cells' function. So SDS decellularization is a better preparative techniaue for tissue engineering.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
  • 地址:重庆市沙坪坝区高滩岩30号第三军医大学学报编辑部
  • 邮编:400038
  • 邮箱:aammt@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023- 68752187
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1126/R
  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:47530