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鸡p15^INK4B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
  • ISSN号:1000-5684
  • 期刊名称:《吉林农业大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q511[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]吉林大学畜牧兽医学院,长春130062, [2]西南大学生命科学学院,重庆400715, [3]河北科技师范学院生命科学系,秦皇岛066000
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30471284),吉林大学博士启动基金项目
中文摘要:

用制备并纯化的鸡p15^INK4B蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了p15^INK4B蛋白的单克隆抗体,并进行了鉴定。结果表明:2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株105和3F5分别属于IgG1和IgM抗体亚类;培养上清的效价分别为1:820和1:680,腹水的效价分别为1:4×10^6和1:7×10^5;2株单克隆抗体亲和力常数分别为3.13×10^9L/mol(1C6)和1.24×10^8L/mol(3F5),相对亲和力1C6〉3F5,且具有不同的抗原识别位点;Westem-blot鉴定表明,1C6和3F5这2株单克隆抗体均能与原核表达纯化的和杆状病毒表达的p15^INK4B蛋白结合,而不与其他蛋白结合,说明本研究成功制备了鸡p15^INK4B的单克隆抗体,可作为深入研究鸡p15^INK4B蛋白的功能提供特异的抗体材料。

英文摘要:

Preparation of monoclonal antibody (McAb) against chicken p15^INK4B (p15) protein was carfled out for the function research of pl5.The purified p15 protein as antigen immunized BALB/c mice. Two hybridoma, 1C6 and 3F5, stably secreting McAb were produced by fusion of SP2/0 myeloma cells and spleen cells of syngeneic mice which had been previously immunized by p15 protein. Their titers in cell culture supematant were 1 : 820 and 1 : 680 respectively, titers in ascites were 1 : 4 ×10^6 and i : 7×10^5 respectively, and affinity constants were 3.13 × 10^9 and 1.24 ×108 L/mol respectively. The monoclonal antibodies were of high affinity and different antigen binding epitope, and they could specifically bind to p15 protein purified from prokaryotic expressing product and expressed in BAC-TO-BAC Baculovirus Ex- pression Systems but not other cell proteins. All of these show that the McAb against p15 was successfully prepared.

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期刊信息
  • 《吉林农业大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:吉林省教育厅
  • 主办单位:吉林农业大学
  • 主编:秦贵信
  • 地址:吉林省长春市新城大街2888号
  • 邮编:130118
  • 邮箱:jlndxb@vjlav.edu.cn
  • 电话:0431-84532914
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5684
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1100/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊,全国中文农业类核心期刊,中国科技论文统计源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16398